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产品名称:
肺鳞癌细胞;NCI-H520
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  肺鳞癌细胞;NCI-H520的详细资料:

公司细胞广泛用于国内院校的细胞生物学研究,作为实验项目研究。下列产品详细介绍:

产品名称

生长特性

货号

肺鳞癌细胞;NCI-H520

贴壁生长

EY-X63355

细胞名称  肺鳞癌细胞;NCI-H520
形态特性: 上皮样

生长特性: 贴壁生长

特征特性: 1982年GazdarAF等建系,源于鳞状细胞肺癌组织;该细胞p53mRNA表达水平较正常肺组织低,但是没有大的结构DNA的异常。角蛋白、波形蛋白阳性,神经丝三联蛋白阴性;该细胞在软琼脂中可形成。

培养条件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

传代方法: 1:3~1:6传代;2~3天换液1次。

传代情况: C6

冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS

支原体检测: 培养法(-)

冷冻保存细胞之方法
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法; 
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理; 
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻; 
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率; 
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
小鼠杂交瘤细胞NC-4D12形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 悬浮生长Anti-CTGF Polyclonal Antibody

小鼠杂交瘤细胞株;2H4形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 悬浮生长Anti-ALOXE3 Polyclonal Antibody

肾透明细胞癌细胞舒尼替尼耐药株;ACSuR形态特性: 上皮样生长特性: 贴壁生长Anti-MT-CO2 Ponoclonal Antibody

欧洲鳗鲡肝脏细胞系;EL形态特性: 上皮样生长特性: 贴壁生长Anti-SPAG8 Polyclonal Antibody

小鼠杂交瘤细胞株;3B8形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 悬浮生长Anti-AFF4 Polyclonal Antibody

小鼠杂交瘤细胞株;4-F10形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 悬浮生长Anti-DSG1 Polyclonal Antibody

常肝细胞并芘转化细胞系;HL-7702BaPT形态特性: 上皮样生长特性: 贴壁生长Anti-HSP90B1 Polyclonal Antibody

一种产生抗罗非鱼无乳链球菌的单克隆抗体的杂交瘤细胞株;3A9形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 贴壁生长Anti-KIF1C Polyclonal Antibody

曲妥珠单抗(赫塞汀)耐药的人癌细胞;BT-474/HR形态特性: 上皮样生长特性: 贴壁生长Anti-UCP3 Polyclonal Antibody

癌细胞株;Huh-7/M8形态特性: 上皮样生长特性: 贴壁生长Anti-NOSIP Polyclonal Antibody

小鼠杂交瘤细胞株;2B11形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 悬浮生长Anti-GOT1 Polyclonal Antibody

小鼠杂交瘤细胞株;PP65形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 悬浮生长Anti-HTR3A Polyclonal Antibody

癌细胞株;Huh-7/F24形态特性: 上皮样生长特性: 贴壁生长Anti-HFH4 Polyclonal Antibody

一种产生抗罗非鱼无乳链球菌的单克隆抗体的杂交瘤细胞株;4C12形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 贴壁生长Anti-RSU1 Polyclonal Antibody

小鼠杂交瘤细胞株;FlounderIgM-H形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 悬浮生长Anti-IRAK4 Polyclonal Antibody

小鼠杂交瘤细胞株;IE1形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 悬浮生长Anti-AKAP8 Polyclonal Antibody
肺鳞癌细胞;NCI-H520大鼠白介素1(IL-1)ELISA试剂盒GHRPELISAKit产品规格:48T/96T。

大鼠S100B蛋白(S-100B)ELISA试剂盒GHRPELISAKit产品规格:48T/96T。

大鼠S100蛋白(S-100)ELISA试剂盒GHRPELISAKit产品规格:48T/96T。

大鼠可溶性P选择素(sP-selectin)ELISA试剂盒GHRPELISAKit产品规格:48T/96T。

大鼠Ⅰ型前胶原羧基端肽(PⅠCP)ELISA试剂盒GHRPELISAKit产品规格:48T/96T。

大鼠Ⅰ型胶原(ColⅠ)ELISA试剂盒GHRPELISAKit产品规格:48T/96T。

大鼠Ⅱ型胶原(ColⅡ)ELISA试剂盒GHRPELISAKit产品规格:48T/96T。

大鼠Ⅲ型前胶原肽(PⅢNP)ELISA试剂盒GHRP-GhrelinELISAKit产品规格:48T/96T。
操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除细胞消化液。加入含血清的  *细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除细胞消化液后,加入含血清的*培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。

 

产品相关关键字: 肺鳞癌细胞 NCI-H520
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