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产品名称:
家猫皮肤细胞;FCA-S1
产品型号:
产品报价:
1360
产品特点:
家猫皮肤细胞;FCA-S1相关产品:
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  家猫皮肤细胞;FCA-S1的详细资料:

公司细胞广泛用于国内院校的细胞生物学研究,作为实验项目研究。下列产品详细介绍:

产品名称

生长特性

货号

家猫皮肤细胞;FCA-S1

贴壁生长

EY-X63763

细胞名称  家猫皮肤细胞;FCA-S1
形态特性: 成纤维细胞样

生长特性: 贴壁生长

特征特性: 该细胞系来源于一雄性家猫的皮肤组织。2000年由中国科学院昆明细胞库建立。

培养条件: M-199:withEarle'sBalancedSaltsSolution(EBSS)15%NBS

传代方法: 1:2传代;3-4天一次

传代情况: P3

冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS

支原体检测: 荧光法(-)

冷冻保存细胞之方法
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法; 
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造,并经过铬酸洗液处理; 
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻; 
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率; 
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
H-ras检测试剂盒细胞名称: 小鼠成纤维细胞;φ2形态特性: 成纤维细胞样H-ras

IFN-γR1-CDw119检测试剂盒细胞名称: 小鼠骨髓瘤细胞;Sp2/0-Ag14[SP20]形态特性: 淋巴母细胞样;圆形IFN-γR1-CDw119

KIT Ligand检测试剂盒细胞名称: 人肾上腺皮质癌细胞;SW-13形态特性: 上皮样;多角KIT Ligand

L1细胞粘附分子检测试剂盒细胞名称: 人结直肠癌细胞;T84形态特性: 上皮样;多角L1 cell adhesion molecule

Laminin-5;Epiligrin检测试剂盒细胞名称: 人神经胶质细胞瘤细胞;U251形态特性: 多角Laminin-5;Epiligrin

Mac-2结合蛋白检测试剂盒细胞名称: 人急性单核细胞白血病细胞;THP-1形态特性: 单核细胞 Mac-2BP

MEK激酶检测试剂盒细胞名称: 非洲绿猴肾细胞;VERO形态特性: 上皮样细胞MEK

MEST检测试剂盒细胞名称: 人组织细胞淋巴瘤细胞;U937[U-937]形态特性: 单核细胞Mesoderm-specific transcript homolog protein

microRNA-210检测试剂盒细胞名称: 小鼠垂体瘤细胞(分泌促生长激素分泌激素);AtT-20形态特性: 小圆形细胞microRNA-210

Spondin-2;mindin检测试剂盒细胞名称: 小鼠小胶质细胞;BV2形态特性: 多形型Spondin-2

MRP-14检测试剂盒细胞名称: 小鼠骨髓瘤细胞;Fox-NY形态特性: 淋巴母细胞样Myeloid-related portein8;14

肾上腺髓质前体中段肽检测试剂盒细胞名称: 人胃腺癌细胞;BGC-823形态特性: 上皮样midregional fragment of pro-adrenomedullin

MxA蛋白检测试剂盒细胞名称: 兔主动脉平滑肌细胞;CCC-SMC-1形态特性: 多角MxA Protein

NADH-细胞色素b5还原酶检测试剂盒细胞名称: 人皮肤成纤维细胞;CCC-HSF-1形态特性: 成纤维细胞样NADHcytochrome b5 reductase

NOD样受体1检测试剂盒细胞名称: 人纤维肉瘤细胞;HT-1080形态特性: 上皮样NOD-1

NOD样受体-2检测试剂盒细胞名称: 人耐VP16绒癌细胞株;JEG-3/VP16形态特性: 上皮样;多角NOD-2

OX40 Ligand检测试剂盒细胞名称: TNFa转染耐VP16绒癌细胞;JEG-3-VP16-TNFa形态特性: 上皮样;多角OX40 Ligand
家猫皮肤细胞;FCA-S1LB琼脂(lennox)规格:250g用途:用于分子生物学中大肠杆菌的培养

桑塔斯琼脂培养基规格:详情介绍

大肠杆菌成套生化鉴定管(DCSN)规格:4种*4套用途:用于大肠杆菌的IMVC生化鉴定组成:蛋白胨水(色氨肉汤)4支、MR-VP 8支、Korser氏枸橼盐肉汤4支。(需甲基红试剂盒、V-P试剂盒、Kovace靛基质试剂盒配套使用)

含青霉素酶的TSA表面接触皿(55mm)规格:10个/包用途:用于环境、器皿、设备和表面的无菌检测。

无菌均质袋(32cm*20cm)(不带压条)规格:100个/包用途:用于样品的均质

克氏双糖铁琼脂规格:250g用途:用于细菌复合生化试验(葡萄糖,乳糖)
操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的  完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。

 

产品相关关键字: 家猫皮肤细胞 FCA-S1
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