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产品展示   ProductsATCC细胞>>转化细胞>>大耳山羊皮肤细胞;LDG-3
 
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产品名称:
大耳山羊皮肤细胞;LDG-3
产品型号:
产品报价:
1360
产品特点:
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  大耳山羊皮肤细胞;LDG-3的详细资料:

公司细胞广泛用于国内院校的细胞生物学研究,作为实验项目研究。下列产品详细介绍:

产品名称

生长特性

货号

大耳山羊皮肤细胞;LDG-3

贴壁生长

EY-X63766

细胞名称  大耳山羊皮肤细胞;LDG-3
形态特性: 成纤维细胞样

生长特性: 贴壁生长

特征特性: 该细胞系来源于一雄性大耳山羊的皮肤组织。1990年由中国科学院昆明细胞库建立。

培养条件: M-199:withEarle'sBalancedSaltsSolution(EBSS)15%NBS

传代方法: 1:2;3-4天一次

传代情况: P5

冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS

支原体检测: 荧光法(-)

冷冻保存细胞之方法
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法; 
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造,并经过铬酸洗液处理; 
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻; 
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率; 
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
β2糖蛋白检测试剂盒细胞名称: 人胚皮肤成纤维细胞;CCC-ESF-1形态特性: 成纤维细胞样β2-Glycoprotein

β2糖蛋白1抗体IgA;G;M检测试剂盒细胞名称: 人结直肠腺癌细胞;HT-29形态特性: 上皮样β2-glycoprotein 1 antibody IgA;G;M

β2整合素检测试剂盒细胞名称: 人巨细胞白血病细胞株;Mo7e形态特性: 圆形integrin β2

β淀粉酶检测试剂盒细胞名称: 人非小细胞肺腺癌细胞;NCI-H157形态特性: 多角β-amylase

β痕迹蛋白检测试剂盒细胞名称: 小鼠肥大细胞瘤细胞;P815形态特性: 淋巴母细胞样β-trace protein

γ干扰素诱导蛋白16检测试剂盒细胞名称: 中国仓鼠卵巢细胞;CHO形态特性: 上皮样interferon-inducible protein 16

阿尔茨海默病相关神经丝蛋白检测试剂盒细胞名称: 昆虫卵巢细胞;SF9形态特性: 圆形AD7c-NTP

癌基因蛋白质p190;bcr-abl检测试剂盒细胞名称: 人前列腺癌细胞;PC-3[PC3]形态特性: 上皮样p190;bcr-abl

癌症促凝素检测试剂盒细胞名称: 人红系白血病细胞;TF-1形态特性: 淋巴母细胞样Cancer Procoagulant

氨基甲酰磷合成酶2检测试剂盒细胞名称: 人导管瘤细胞;UACC812形态特性: 上皮样carbamyl phosphate synthetase-2

八聚体结合转录因子4检测试剂盒细胞名称: 人绒癌细胞;JEG-3形态特性: 上皮样Octamer Binding Transcription Factor 4

白介素12受体β2检测试剂盒细胞名称: 人类原巨核细胞型白血病细胞;UT-7形态特性: 圆形Interleukin 12 receptorβ2

白介素17受体检测试剂盒细胞名称: 小鼠胚胎成纤维细胞;3T6-Swissalbino形态特性: 成纤维细胞样Interleukin 17 Receptor

白介素18受体检测试剂盒细胞名称: 白介素-2转染耐VP16绒癌细胞;JEG-3/VP16-IL-2形态特性: 上皮样;多角Interleukin 18 Receptor

白介素1β转换酶检测试剂盒细胞名称: 人APP-PS1(C410Y)双基因转染细胞株;7WCY1.0形态特性: 多角Interleukin 1β converting enzyme

白介素1家族成员10检测试剂盒细胞名称: 人急性T淋巴细胞白血病细胞;Jurkat,CloneE6-1形态特性: 淋巴母细胞样Interleukin-1 family member 10

白介素1可溶性受体Ⅱ检测试剂盒细胞名称: 人APP-PS1(M146L)双基因转染CHO细胞株;7WML6.0形态特性: 多角IL-1sRⅡ
大耳山羊皮肤细胞;LDG-3厌氧菌液体培养基规格:250g拉丁属名:Anaerobic Liquid Medium

仔猪副伤寒培养基规格:1万毫升用途:用于仔猪副伤寒疫苗生产

维生素C(抗坏血)规格:10g详情介绍

SSDC培养基(ISO)规格:250g用途:用于小肠结肠耶尔森氏菌的分离培养

支原体半流体培养基基础规格:1000ml详情介绍

无盐胰胨水规格:20支用途:用于副溶血性弧菌生化鉴定
操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的  完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。

 

产品相关关键字: 大耳山羊皮肤细胞 LDG-3
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