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产品名称:
小鼠胚胎成纤维细胞;BALB/C3T3
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小鼠胚胎成纤维细胞;BALB/C3T3相关产品:
崩溃酶说明书
亮绿SF(淡黄)5141-20-8
紫脲酸铵3051-09-0
孔雀绿说明书
  小鼠胚胎成纤维细胞;BALB/C3T3的详细资料:

公司细胞广泛用于国内院校的细胞生物学研究,作为实验项目研究。下列产品详细介绍:

产品名称

生长特性

货号

小鼠胚胎成纤维细胞;BALB/C3T3

贴壁生长

EY-X63343

细胞名称  小鼠胚胎成纤维细胞;BALB/C3T3
形态特性: 成纤维细胞样

生长特性: 贴壁生长

特征特性:

培养条件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS

传代方法: 1:3传代;2~3天1次。

传代情况: C3

冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS

支原体检测: 培养法(-)

冷冻保存细胞之方法
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法; 
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理; 
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻; 
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率; 
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
人肝癌细胞;Hep3B2.1-7形态特性: 上皮样;多角形生长特性: 贴壁生长Anti-DLG1 Polyclonal Antibody

人脐静脉细胞融合细胞;EA.hy926形态特性: 梭形生长特性: 贴壁生长Anti-SERPINA7 Polyclonal Antibody

人肝母细胞瘤细胞;HuH-6形态特性: 上皮样;多角形生长特性: 贴壁生长Anti-CRAT Polyclonal Antibody

人非小细胞肺癌细胞;HCC827形态特性: 上皮样;多角形生长特性: 贴壁生长Anti-KLRB1 Polyclonal Antibody

小鼠颅盖成纤维细胞;OP9形态特性: 成纤维样生长特性: 贴壁生长Anti-FLOT1 Polyclonal Antibody

人胃癌细胞;NCI-N87[N87]形态特性: 上皮样生长特性: 贴壁生长Anti-Eif2ak2 Polyclonal Antibody

人胃腺癌细胞;AGS形态特性: 上皮样生长特性: 贴壁生长Anti-LMNB2 Polyclonal Antibody

人肺腺癌细胞;NCI-H1395形态特性: 上皮样;多角形生长特性: 贴壁生长Anti-SNRPE Polyclonal Antibody

人喉癌细胞;LCC形态特性: 上皮样生长特性: 贴壁生长Anti-GPC3 Polyclonal Antibody

人胃癌细胞;MKN-28形态特性: 上皮样生长特性: 贴壁生长Anti-FKBP4 Polyclonal Antibody

人内膜低分化腺癌细胞;EAG3形态特性: 上皮样;多角形生长特性: 贴壁生长Anti-CDK10 Polyclonal Antibody

人结直肠腺癌细胞长春新耐药株;HCT-8/V形态特性: 上皮样;多角形生长特性: 贴壁生长Anti-P2X3 Polyclonal Antibody

小鼠肺成纤维样细胞;C57/B6-L形态特性: 成纤维样细胞生长特性: 贴壁生长Anti-MYH9 Polyclonal Antibody

小鼠皮肤成纤维样细胞;C57/B6-S形态特性: 成纤维样细胞生长特性: 贴壁生长Anti-IFNAR2 Polyclonal Antibody

人内膜异位症患者在位内膜间质细胞永生化细胞;hEM15A形态特性: 梭形生长特性: 贴壁生长Anti-ECI1 Polyclonal Antibody

SV40转染人成骨细胞;hFOB1.19形态特性: 多角生长特性: 贴壁生长Anti-CAPZA1 Polyclonal Antibody
小鼠胚胎成纤维细胞;BALB/C3T3大鼠可溶性血管内皮细胞蛋白C受体(sEPCR)ELISA试剂盒FNELISAKit产品规格:48T/96T。

大鼠1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βDglucosidase)ELISA试剂盒FNELISAKit产品规格:48T/96T。

大鼠内分泌腺来源的血管内皮生长因子(EG-VEGF)ELISA试剂盒FOXO1ELISAKit产品规格:48T/96T。

大鼠嗜粒细胞趋化因子(ECF)ELISA试剂盒FOXO2ELISAKit产品规格:48T/96T。

大鼠嗜粒细胞趋化蛋白Eotaxin1(Eotaxin1/CCL11)ELISA试剂盒FOXO3ELISAKit产品规格:48T/96T。

大鼠红细胞生成素受体(EPOR)ELISA试剂盒FOXO4ELISAKit产品规格:48T/96T。

大鼠红细胞生成素(EPO)ELISA试剂盒FPAELISAKit产品规格:48T/96T。

大鼠凋亡相关因子(FAS/CD95)ELISA试剂盒FPBELISAKit产品规格:48T/96T。
操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除细胞消化液。加入含血清的  *细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除细胞消化液后,加入含血清的*培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。

 

产品相关关键字: 小鼠胚胎成纤维细胞 BALB/C3T3
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