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产品展示   ProductsATCC细胞>>转化细胞>>恒河猴肾细胞;RM-2
 
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产品名称:
恒河猴肾细胞;RM-2
产品型号:
产品报价:
1360
产品特点:
恒河猴肾细胞;RM-2相关产品:
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  恒河猴肾细胞;RM-2的详细资料:

公司细胞广泛用于国内院校的细胞生物学研究,作为实验项目研究。下列产品详细介绍:

产品名称

生长特性

货号

恒河猴肾细胞;RM-2

贴壁生长

EY-X63770

细胞名称  恒河猴肾细胞;RM-2
形态特性: 上皮样

生长特性: 贴壁生长

特征特性: 该细胞系来源于一雌性猕猴的肾组织。2004年由中国科学院昆明细胞库建立。

培养条件: M-199:withEarle'sBalancedSaltsSolution(EBSS)15%NBS

传代方法: 1:2传代;3-4天一次

传代情况: P3

冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS

支原体检测: 荧光法(-)

冷冻保存细胞之方法
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法; 
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造,并经过铬酸洗液处理; 
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻; 
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率; 
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
二氢乳清脱氢酶检测试剂盒细胞名称: 人细胞;Hela229[HeLa229]形态特性: 上皮样Dihydroorotate dehydrogenase

反应蛋白7A域检测试剂盒细胞名称: Sars结构蛋白表达株;293001B形态特性: 上皮样Thrombospondin type-1 domain-containing protein 7A

泛素A52残留核糖体蛋白融合产物1检测试剂盒细胞名称: Sars结构蛋白表达株;293001A形态特性: 上皮样Ubiquitin A 52 Residue Ribosomal Protein Fusion Product 1

泛素蛋白D检测试剂盒细胞名称: 大鼠肝细胞瘤;H-4-II-E形态特性: 上皮样ubiquitin D

非受体型蛋白酪氨激酶检测试剂盒细胞名称: 人细胞;HelaP10s-11F形态特性: 上皮样NRTK

非酰基化Ghrelin检测试剂盒细胞名称: 大鼠肝细胞瘤;H4-II-E-C3形态特性: 上皮样UAG

肥大细胞羧肽酶检测试剂盒细胞名称: 小鼠胚胎成纤维细胞;BALB/C3T3形态特性: 成纤维细胞样mast cell carboxypeptidase

肺癌抗原检测试剂盒细胞名称: 果子狸肾上皮细胞;Hed68形态特性: 圆形Antigens of lung cancer

肺表面活性物质相关蛋白A2检测试剂盒细胞名称: 兔主动脉平滑肌细胞;CCC-SMC-2形态特性: 多角Pulmonary surfatcant-associated protein A2

肺耐药蛋白检测试剂盒细胞名称: 人细胞;HelaS3[HeLaS3]形态特性: 上皮样Lung resistance-related protein

肺特异性X蛋白检测试剂盒细胞名称: 人胰腺腺泡上皮癌;HPAC形态特性: 上皮样Lung Specific X Protein

父系表达基因10检测试剂盒细胞名称: 人T淋巴细胞白血病细胞;HuT78形态特性: 淋巴母细胞样paternally expressed 10

附睾分泌蛋白4检测试剂盒细胞名称: 小鼠肺腺癌细胞系;LA795形态特性: 上皮样epididymis protein4

钙泵检测试剂盒细胞名称: 小鼠淋巴细胞白血病;L1210形态特性: 淋巴母细胞样Serca

钙调素;钙调蛋白检测试剂盒细胞名称: 大鼠骨骼肌成肌细胞;L6形态特性: 成肌细胞样calmodulin

甘露聚糖结合凝集素相关丝氨蛋白酶检测试剂盒细胞名称: 人胚胎气管组织来源细胞;CCC-HBE-2形态特性: mannan binding lectin associated serine protease

肝癌衍生生长因子检测试剂盒细胞名称: C3H/An小鼠结缔组织细胞(L929-TK-);LTK-形态特性: 成纤维细胞样hepatoma-derived growth factor
恒河猴肾细胞;RM-2头孢菌素纸片(30ug/片)规格:10片/瓶用途:用于空肠弯曲菌药敏试验。

吖啶黄素(2.5mg/支)规格:1ml/支*5用途:每支添加于100mlMFB培养基中

1/4MS培养基(不含琼脂和蔗糖)规格:250g用途:用于植物的组织培养。

去氧胆钠规格:100g用途:用于抑制革兰氏阳性菌的生长

2.5L微需氧产气包规格:10个/包用途:用于微需氧微生物的培养

OF实验培养基规格:BR250g详情介绍
操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的  完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。

 

产品相关关键字: 恒河猴肾细胞 RM-2
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