实验要点及说明：
1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
公司细胞广泛用于国内院校的细胞生物学研究，作为实验项目研究。下列产品详细介绍：
产品名称 | 生长特性 | 货号 |
乳腺癌细胞；Hs578T | 贴壁生长 | EY-X63570 |
细胞名称 乳腺癌细胞；Hs578T
形态特性: 上皮细胞
生长特性: 贴壁生长
特征特性: Hs578T细胞株源自乳房癌。它与正常成纤维细胞样细胞株Hs578Bst起源于同一位患者。Hs578T细胞株最初是多角形的，但在传代过程中选择并了星形的细胞形态。电镜下观察到酪蛋白颗粒聚集，桥粒，紧密连接，脂质体和光滑内质网小泡。与Hs578Bst一样，未检测到雌激素受体和内生病毒。
培养条件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)优质胎牛血清，10%；0.01mg/ml牛胰岛素
传代方法: 消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
传代情况: P(49+5)
冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测: 阴性
冷冻保存细胞之方法
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除细胞消化液。加入含血清的 *细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除细胞消化液后，加入含血清的*培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
Mycoplasma primatum Del Giudice et al.细胞名称: 小鼠杂交瘤细胞NC-
36372Human SPTBN1 ELISA Kit
杂交瘤株；2F4拉丁属名: Tardiphaga robiniae5-溴吡啶-3-甲酸Human SPOCK1 ELISA Kit
小鼠骨髓杂交瘤株；10H4拉丁属名: Phytophthora syringoe5-溴吡啶-3-甲酸Human SPTBN2 ELISA Kit
小鼠骨髓杂交瘤株； 10B11注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用5-溴吡啶-3-甲酸Human SSTR5 ELISA Kit
杂交瘤株；FFA-C注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用抗氧剂1076Human SPPL2A ELISA Kit
杂交瘤株；FABP 4A8注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用抗氧剂1076Human HDAC8(Histone deacetylase 8) ELISA Kit
杂交瘤株；2-2拉丁属名: Paenibacillus pinihumi抗氧剂1076Human Sprr2i ELISA Kit
杂交瘤株；9-1拉丁属名: Escherichia coli二甲基烯酸1,4-丁二酯Human SPR ELISA Kit
杂交瘤株；9-2拉丁属名: Bosea lathyri3-甲基-2-丁硫Human SRBD1 ELISA Kit
杂交瘤株；49-2拉丁属名: Bacillus sp.3-甲基-2-丁硫Human SPRR3 ELISA Kit
杂交瘤株；1-35-1拉丁属名: Hyphoderma setigerum1-甲基哌啶基-2-甲Human SPRY2 ELISA Kit
杂交瘤株；13-2拉丁属名: Rhizobium giardinii1-甲基哌啶基-2-甲Human SPRY3 ELISA Kit
杂交瘤株；10-2拉丁属名: Micrococcus sp.1-甲基哌啶基-2-甲Human SPATS2L ELISA Kit
杂交瘤株；8-1注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用8-羟基喹啉铝Human SPRY4 ELISA Kit
杂交瘤株；23-1注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用8-羟基喹啉铝Human SPRYD5 ELISA Kit
杂交瘤株；18-1拉丁属名: Escherichia coli8-羟基喹啉铝Human MYOG(Myogenin) ELISA Kit
杂交瘤株；27-1拉丁属名: Saccharomyces pastorianusN,N'-二叔丁氧羰基-L-Human SPTLC2 ELISA Kit
杂交瘤株；T-Ⅱ用途: Degrades celluloseN,N'-二叔丁氧羰基-L-Human SPCS1 ELISA Kit
杂交瘤株；COC1501用途: 植物病原物，为该病防治提供依据4-O-(β-吡喃半乳糖)-D-吡喃甘露糖苷Human SPRED2 ELISA Kit
杂交瘤株；PCP1310注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，
乳腺癌细胞；Hs578T人抗乙型肝炎病表面抗体(HBsAb)ELISA试剂盒SykELISAKit产品规格:48T/96T。
人抗乙型肝炎病核心IgG抗体(HBcAb-IgG)ELISA试剂盒T.gondiiELISAKit产品规格:48T/96T。
人抗乙型肝炎病核心IgM抗体(HBcAb-IgM)ELISA试剂盒T3ELISAKit产品规格:48T/96T。
人抗乙型肝炎病核心抗体(HBcAb)ELISA试剂盒T3ELISAKit产品规格:48T/96T。
人天门冬氨转氨酶/谷草转氨酶(GOT/GPT)ELISA试剂盒T3ELISAKit产品规格:48T/96T。
人丙氨转氨酶/谷丙转氨酶(ALT/GPT)ELISA试剂盒T3ELISAKit产品规格:48T/96T。
人乙型肝炎表面抗原(HBsAg)ELISA试剂盒T3ELISAKit产品规格:48T/96T。
人基质金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP-1)ELISA试剂盒T4ELISAKit产品规格:48T/96T。
