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产品展示   ProductsATCC细胞>>转化细胞>>小耳猪肺细胞;SEP-L1
 
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产品名称:
小耳猪肺细胞;SEP-L1
产品型号:
产品报价:
1360
产品特点:
小耳猪肺细胞;SEP-L1相关产品:
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  小耳猪肺细胞;SEP-L1的详细资料:

细胞名称  小耳猪肺细胞;SEP-L1
形态特性: 成纤维细胞样

生长特性: 贴壁生长

特征特性: 该细胞系来源于一雌性小耳猪的皮肤组织。1988年由中国科学院昆明细胞库建立。

培养条件: M-199:withEarle'sBalancedSaltsSolution(EBSS)15%NBS

传代方法: 1:2传代;3-4天一次

传代情况: P2

冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS

支原体检测: 荧光法(-)
公司细胞广泛用于国内院校的细胞生物学研究,作为实验项目研究。下列产品详细介绍:

产品名称

生长特性

货号

小耳猪肺细胞;SEP-L1

贴壁生长

EY-X63760


冷冻保存细胞之方法
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法; 
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造,并经过铬酸洗液处理; 
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻; 
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率; 
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的  完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。
1,3-二磷甘油检测试剂盒细胞名称: 大鼠垂体瘤细胞;GH3形态特性: 上皮样1,3-Disphosphoglycerate

1,5-脱水葡萄糖醇;1,5-脱水山梨检测试剂盒细胞名称: 小鼠胚胎成纤维细胞;3T3-Swissalbino形态特性: 成纤维细胞样1,5-Anhydroglucitol

11去氢血栓B2检测试剂盒细胞名称: 二氢叶还原酶缺陷型中国仓鼠卵巢细胞;CHO/dhFr-形态特性: 上皮样11-dehydro-thromboxane B2

11脱氢血栓素B2检测试剂盒细胞名称: 小鼠垂体瘤细胞;GT1-1形态特性: 上皮样11-dehydro-thromboxane B2

17-皮质类固醇检测试剂盒细胞名称: 人前列腺癌细胞;DU145[DU145;DU-145]形态特性: 上皮样l7-ketosteroid

2-硫代噻唑-4-羧检测试剂盒细胞名称: 人胚肾细胞;293[HEK-293]形态特性: 上皮样2-thiothiazolidine-4-carboxylic acid

3型1-磷鞘氨醇受体检测试剂盒细胞名称: 人肺癌细胞;A549[A-549]形态特性: 上皮样;多角形sphingosine 1-phosphate receptor type 3

5-羟色胺转运体蛋白检测试剂盒细胞名称: 小鼠胚胎成骨细胞前体细胞;MC3T3-E1形态特性: 成纤维细胞样Serotonin Transporter 

6丙酰四氢蝶呤合酶检测试剂盒细胞名称: 人癌细胞;MCF7形态特性: 上皮样 6-pyruvoyl tetrahydrobiopterin synthase

70kDa热休克蛋白5检测试剂盒细胞名称: 人细胞;HeLa形态特性: 上皮样Heat Shock 70 KDa Protein 5

Ⅸ型胶原蛋白检测试剂盒细胞名称: 人癌细胞;MDA-MB-453形态特性: 上皮样;多角形Collagen Type Ⅸ

adropin检测试剂盒细胞名称: 小鼠神经母细胞瘤细胞与大鼠胶质瘤细胞之融合细胞;NG108-15[108CC15]形态特性: 扁平;圆形;直径10~100mmadropin

AP2A2检测试剂盒细胞名称: 小鼠畸胎瘤细胞;P19形态特性: 上皮样Adaptor-Related Protein Complex 2, alpha 2 Subunit

Argonaut-2蛋白检测试剂盒细胞名称: 人恶性多发性畸胎瘤细胞;NTERA-2形态特性: 上皮样Argonaut2

ATP依赖的RNA解旋酶A检测试剂盒细胞名称: 人卵巢畸胎瘤细胞;PA-1形态特性: 上皮样DHX9

B7-1检测试剂盒细胞名称: 小鼠胚胎成纤维细胞;NIH/3T3形态特性: 成纤维细胞样B7-1

B7同系物6检测试剂盒细胞名称: 人胰腺癌细胞;PANC-1形态特性: 上皮样;多角形B7-H6
小耳猪肺细胞;SEP-L1Stuart运送培养基规格:250g用途:用于致病菌标本的运送保存

K氏培养基规格:250g用途:用于果汁或浓缩果汁中脂环芽孢杆菌和其他耐热耐菌检测(滤膜法)

胆盐七叶苷琼脂规格:250g用途:用于肠球菌和肠道致病菌的分离培养

快速硫化氢试验琼脂规格:250g用途:用于弯曲杆菌的硫化氢试验(GB标准)

Bolton肉汤规格:Bolton肉汤添加剂详情介绍

麦芽汁培养基规格:250g用途:用于霉菌和酵母菌增菌培养

产品相关关键字: 小耳猪肺细胞 SEP-L1
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