公司细胞广泛用于国内院校的细胞生物学研究,作为实验项目研究。下列产品详细介绍:
产品名称 | 生长特性 | 货号 |
中华菊头蝠皮肤细胞;CHBS2 | 贴壁生长 | EY-X63730 |
细胞名称 中华菊头蝠皮肤细胞;CHBS2
形态特性: 成纤维细胞样
生长特性: 贴壁生长
特征特性: 该细胞来源于一雌性中华菊头蝠耳部的皮肤组织。中国科学院昆明细胞库于2005年建立。
培养条件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)15%NBS
传代方法: 1:2传代;3-4天一次
传代情况: P2
冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测: 荧光法(-)
冷冻保存细胞之方法
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
Mikanin
CAS No.:4324-53-2
中文名:
分子式:C18H16O7
泊 订购|咨询 蛋白激酶Cα(PKCα) 规格: 300mg
发酵冬夏草菌粉 订购|咨询 蛋白激酶Cα相互作用蛋白1(PICK1) 规格: 0.5g
异靛 订购|咨询 蛋白激酶Cα相互作用蛋白1(PICK1) 规格: 100mg
订购|咨询 蛋白激酶Cα相互作用蛋白1(PICK1) 规格: 50mg
反式 订购|咨询 蛋白激酶Cβ1(PKCβ1) 规格: 50mg
索地平杂质Ⅱ 订购|咨询 蛋白激酶Cβ1(PKCβ1) 规格: 50mg
孕三 订购|咨询 蛋白激酶Cγ(PKCγ) 规格: 50mg
异山梨 订购|咨询 蛋白激酶Cγ(PKCγ) 规格: 100mg
醋芬 订购|咨询 蛋白激酶Cδ(PKCδ) 规格: 100mg
十一睾 订购|咨询 蛋白激酶Cδ(PKCδ) 规格: 50mg
甜瓜蒂 订购|咨询 蛋白激酶Cε(PKCε) 规格: 1g
二十碳酯 订购|咨询 蛋白激酶Cε(PKCε) 规格: 25mg/支
高乌素 订购|咨询 蛋白激酶Cε(PKCε) 规格: 100mg
富马芬 订购|咨询 蛋白激酶Cζ(PKCζ) 规格: 50mg
醋地孕 订购|咨询 蛋白激酶Cζ(PKCζ) 规格: 50mg
金黄色葡萄球菌 订购|咨询 蛋白激酶Cζ(PKCζ) 规格: 冻干粉
水杨镁 订购|咨询 蛋白激酶Cη(PKCη) 规格: 50mg
地舍平 订购|咨询 蛋白激酶Cη(PKCη) 规格: 100mg/支
RHBDD3 垂体瘤细胞凋亡抗体 现货供应 0.2ml Sophoricoside
RIP1 受体相互作用蛋白激酶1抗体 现货供应 0.2ml Methylophiopogonanone A
RNF122 环指蛋白122抗体 现货供应 0.2ml Methylophiopogonanone B
RNF36 环指蛋白36抗体 现货供应 0.2ml 7,2Dihydroxy3,4Dimethoxyisoflavan
RNF7/CKBBP1 环指蛋白7抗体 现货供应 0.2ml 3Hydroxy9,10Dimethoxypterocarpan
RPS3 核糖体蛋白S3抗体 现货供应 0.2ml Oroxyloside
RRAGC RAS相关GTP结合蛋白C抗体 现货供应 0.2ml PantoprazoleSodium Sesquihydrate
SAA4/Serum amyloid A 4 protein 血清淀粉样蛋白4抗体 现货供应 0.2ml PantoprazoleSodium Sesquihydrate
二茶 进口、国产 英文名称:Aminophyllinehydrate 含量:AR
二四钙二 进口、国产 英文名称:EDTANaCa 含量:BR,50%
二四钾 进口、国产 英文名称:EDTAK 含量:高纯,73%
二四锰二 进口、国产 英文名称:Ethylenediaminetetraaceticacidmanganesedisodiumsalthydrate 含量:BR,98%
二四铜二 进口、国产 英文名称:Ethylenediaminetetraaceticacidcopper(II)disodiumsalt 含量:0.99
二四锌二 进口、国产 英文名称:Disodiumzincethylenediaminetetraacetatetetrahydrate 含量:BR,98%
二二甲基酯 进口、国产 英文名称:Ethylenedimethacrylate 含量:BR,98%
二缩双邻羟 进口、国产 英文名称:GBHA 含量:生物技术级
二铵 进口、国产 英文名称:Ammoniumoxalatemonohydrate 含量:SP,99%
二二酯 进口、国产 英文名称:Diethyloxalate 含量:AR,99.8%
中华菊头蝠皮肤细胞;CHBS2海藻糖发酵管规格:20支详情介绍
性蛋白胨水颗粒规格:250g用途:用于霍乱弧菌选择性增菌培养(SN标准)
OADC添加剂规格:用途:用于添加于Middle
改良磷盐缓冲液(PBS)规格:9ml*20支/包用途:用于小肠结肠炎耶尔森氏菌增菌培养
植绒采样拭子规格:100支/包用途:用于样品采样
牛血清白蛋白规格:10g详情介绍
操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除细胞消化液。加入含血清的 *细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除细胞消化液后,加入含血清的*培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。