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产品名称:
小耳猪肾细胞;SEPfk
产品型号:
产品报价:
1360
产品特点:
小耳猪肾细胞;SEPfk相关产品:
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  小耳猪肾细胞;SEPfk的详细资料:

公司细胞广泛用于国内院校的细胞生物学研究,作为实验项目研究。下列产品详细介绍:

产品名称

生长特性

货号

小耳猪肾细胞;SEPfk

贴壁生长

EY-X63732

细胞名称  小耳猪肾细胞;SEPfk
形态特性: 成纤维细胞样

生长特性: 贴壁生长

特征特性: 该细胞系来源于一雌性小耳猪的肾组织。1988年由中国科学院昆明细胞库建立。

培养条件: M-199:withEarle'sBalancedSaltsSolution(EBSS)15%NBS

传代方法: 1:2传代;4-5天一次

传代情况: P4

冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS

支原体检测: 荧光法(-)

冷冻保存细胞之方法
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法; 
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造,并经过铬酸洗液处理; 
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻; 
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率; 
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
Volkensiflavone

CAS No.:27542-37-6

中文名:

分子式:C30H20O10

异欧前胡素 订购|咨询  蛋白激酶抑制因子γ(PKIγ) 规格: 20mg

人绒毛膜促性腺激素 订购|咨询  蛋白激酶抑制因子γ(PKIγ) 规格: 22.8IU/支

射干 订购|咨询  蛋白激酶抑制因子γ(PKIγ) 规格: 1g

马鞭草 订购|咨询  蛋白酶1调节因子亚基18(PPP1R18) 规格: 2g

樟脑 订购|咨询  蛋白酶1调节因子亚基1B(PPP1R1B) 规格: 30mg

重组人生长激素单体二聚体 订购|咨询  蛋白酶3调节因子亚基1(PPP3R1) 规格: 0.5mg

大溶液(1mg/ml) 订购|咨询  蛋腺苷转移酶Ⅰα(MAT1α) 规格: 0.3ml

汉黄芩素 订购|咨询  蛋腺苷转移酶Ⅰα(MAT1α) 规格: 20mg

枸橼 订购|咨询  蛋腺苷转移酶Ⅱα(MAT2α) 规格: 200mg

吴茱萸内酯(柠檬苦素) 订购|咨询  隐花色素1(CRY1) 规格: 20mg

人参二 订购|咨询  隐花色素2(CRY2) 规格: 20mg

 订购|咨询  维X受体α(RXRα) 规格: 100mg

甘草铵 订购|咨询  维X受体α(RXRα) 规格: 20mg

无味B晶型 订购|咨询  维受体α(RARα) 规格: 100mg

龙胆(坚龙胆) 订购|咨询  维受体α(RARα) 规格: 1g

人参皂苷Re 订购|咨询  维受体β(RARβ) 规格: 20mg

白当归素; 比克白芷内酯; 比克白芷素 订购|咨询  维受体γ(RARγ) 规格: HPLC≥98%,20mg/支

草质素;蜀葵苷元;蜀葵甙元;3,4′,5 订购|咨询  维受体应答基因1(RARRES1) 规格: HPLC≥98%,20mg/支

BCL2L15  BCL2样15促凋亡蛋白抗体    现货供应 0.2ml Fangchinoline

BTF/BCLAF1  Bcl2相关转录因子抗体    现货供应 0.2ml Solasurine

Bcl rambo/Bcl 2 like 13 protein  Bcl2样凋亡蛋白13抗体    现货供应 0.2ml Sparteini Sulfas

Bcl G/BCL2 like 14  Bcl2样凋亡蛋白14抗体    现货供应 0.2ml ()Sparteini Sulfas

BOK/Bcl 2 like protein 9  Bcl2样凋亡蛋白9抗体    现货供应 0.2ml Synephrine

Bmf/Bcl2 modifying factor  Bcl2蛋白修饰因子抗体    现货供应 0.2ml Synephrine

A4GALT/CD77  α1,4半乳糖基转移酶1    现货供应 0.2ml Synephrine HCl

Blood Group Antigen Precursor  血型抗原前体蛋白抗体    现货供应 0.2ml Cephalomannine

(1十六基)二甲基铵  进口、国产  英文名称:CDAB  含量:IND

基代  进口、国产  英文名称:Ethylbenzene  含量:AR,99%

基异丁基甲基甲  进口、国产  英文名称:3,5Dimethylhexanol  含量:SP,99.8%

 进口、国产  英文名称:Ethanethioamide  含量:AR

脱氢酶  进口、国产  英文名称:AldehydeDehydrogenase,potassiumactivated  含量:BR,5′d(NNNNNNNNN)3′

萘酯  进口、国产  英文名称:αNapthylacetate  含量:超纯,98%

萘酯  进口、国产  英文名称:βNapthylacetate  含量:高纯,98%,无水物

基甲基酯  进口、国产  英文名称:Benzylacetate  含量:1750±50类型

镉二水合物  进口、国产  英文名称:Cadmiumacetatedihydrate  含量:CP,98%

辛酯  进口、国产  英文名称:Octylacetate  含量:AR,98%
小耳猪肾细胞;SEPfk麦芽汁培养基规格:250g用途:用于霉菌和酵母菌增菌培养

平板计数琼脂(PCA)规格:250g用途:标准平板计数琼脂,含糖,用于细菌总数的测定(GB、SN标准)

牛大肠埃希氏菌“o”抗原定型血清规格:1ml用途:有效期10年

改良EC(MEC+n)肉汤规格:新生霉素用途:4.5mg每支含量

霉菌酵母菌快检纸片(污水)规格:20份/包用途:用于霉菌酵母菌快速检验

幽门螺旋杆菌固体培养基规格:250g用途:用于幽门螺杆菌的分离培养
操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的  完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。

 

产品相关关键字: 小耳猪肾细胞 SEPfk
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