公司细胞广泛用于国内院校的细胞生物学研究,作为实验项目研究。下列产品详细介绍:
产品名称 | 生长特性 | 货号 |
胚肺二倍体细胞;HEL-2 | 贴壁生长 | EY-X63739 |
细胞名称 胚肺二倍体细胞;HEL-2
形态特性: 成纤维细胞样
生长特性: 贴壁生长
特征特性: 该细胞系来源于一女性胚胎的肺组织。1986年中国科学院昆明细胞库建立。
培养条件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS
传代方法: 1:2传代;3-4天一次
传代情况: P17
冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测: 荧光法(-)
冷冻保存细胞之方法
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
Luteolin 5,3'-dimethyl ether
CAS No.:62346-14-9
中文名:木犀草素-5,3'-二甲醚
分子式:C17H14O6
缬草三酯 订购|咨询 葡萄糖激酶调节蛋白(GKRP) 规格: 20mg
吴茱萸 订购|咨询 葡萄糖变位酶(PGM2) 规格: 20mg
麝香草 订购|咨询 葡萄糖变位酶1(PGM1) 规格: 20mg
升3OL阿拉伯糖苷 订购|咨询 葡萄糖变位酶2样蛋白1(PGM2L1) 规格: 20mg
芹菜素7OβD葡萄糖苷 订购|咨询 葡萄糖变位酶3(PGM3) 规格: 10mg
猪去氧胆 订购|咨询 葡萄糖变位酶5(PGM5) 规格: 20mg
芒果苷 订购|咨询 葡糖激酶(GNTK) 规格: 20mg
金石蚕苷 订购|咨询 棕榈酰膜蛋白2(MPP2) 规格: 20mg
莲心高 订购|咨询 棕榈酰膜蛋白2(MPP2) 规格: 20mg
荷叶 订购|咨询 棕榈酰膜蛋白5(MPP5) 规格: 20mg
橄榄苦苷 订购|咨询 棕榈酰膜蛋白6(MPP6) 规格: 20mg
佛手柑内酯 订购|咨询 棕榈酰膜蛋白6(MPP6) 规格: 20mg
新绿原 订购|咨询 棕榈酰膜蛋白6(MPP6) 规格: 20mg
胆固 订购|咨询 棘皮动物微管关联蛋白样蛋白2(EML2) 规格: 20mg
订购|咨询 棘皮动物微管关联蛋白样蛋白2(EML2) 规格: 20mg
蟾它灵 订购|咨询 硬纤毛蛋白(STRC) 规格: 10mg
文多灵 订购|咨询 硬骨素(SOST) 规格: 20mg
白术内酯III 订购|咨询 硬骨素(SOST) 规格: 20mg
PARL 骨骼肌细胞线粒体膜蛋白PARL抗体 现货供应 0.2ml Pheniramine Maleate
GYPB/CD235b 血型糖蛋白δ抗体 现货供应 0.2ml FTase Substrate, Fluorogenic
FUT1 岩藻糖转移酶1抗体 现货供应 0.2ml Linaclotide
ICAM4/CD242 细胞间粘附分子4抗体 现货供应 0.2ml benzoylpaeoniflorin
RHCG RH血型C糖蛋白抗体 现货供应 0.2ml 3,4,5Tricaffeoylquinic acid
SLC14A1/RACH1 尿素转运型糖蛋白抗体 现货供应 0.2ml Alisol A 24acetate
XKR1 膜转运蛋白XK抗体 现货供应 0.2ml Alisol C monoacetate
ACSM3 酰基合成酶3抗体 现货供应 0.2ml Sclareolide
油丁酯 进口、国产 英文名称:Butyloleate 含量:AR,98%
铀试剂III 进口、国产 英文名称:ArsenazoIII 含量:BR,96%
有机硅消泡剂 进口、国产 英文名称:Siliconedefoamer 含量:AR,99%
有水铁 进口、国产 英文名称:Ferrichydroxide 含量:2.7N,99.7%
有效 进口、国产 英文名称:Validamycin 含量:BR,猪肠胃
莠去津 进口、国产 英文名称:Atrazine 含量:超纯,100mM
右旋甘 进口、国产 英文名称:LPhenylglycine 含量:BR,99%
右旋泛 进口、国产 英文名称:SodiumDpantothenate 含量:CP,97.5%
右旋酒石 进口、国产 英文名称:DTartaricacid 含量:AR,99.5%
右旋脯甲酯氢物 进口、国产 英文名称:DProlinemethylesterhydrochloride 含量:BR,98%
胚肺二倍体细胞;HEL-2酵母浸出物葡萄糖琼脂培养基规格:250g用途:用于乳和乳制品中酵母菌和霉菌的计数
哥伦比亚血琼脂基础规格:BR250g用途:营养非常丰富,用于各种细菌的基础培养基
10%化钠胰蛋白胨大豆肉汤规格:10ml*20支/包用途:用于金黄色葡萄球菌的MPN测定及增菌培养
木糖赖氨脱氧胆盐琼脂规格:250g用途:用于药品或生物制品中沙门氏菌选择分离培养
百里香酚兰规格:25g用途:微生物指示剂
缓冲蛋白胨水(BPW)规格:250g用途:用于配制肠球菌检测用稀释液
操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除细胞消化液。加入含血清的 *细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除细胞消化液后,加入含血清的*培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。