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产品展示   ProductsATCC细胞>>转化细胞>>胚胎干细胞;Endeavour-1
 
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产品名称:
胚胎干细胞;Endeavour-1
产品型号:
产品报价:
1360
产品特点:
胚胎干细胞;Endeavour-1相关产品:OP9小鼠骨髓基质细胞
VCaP人前列腺癌细胞
TT人甲状腺导管癌细胞
RTE大鼠气管上皮细胞
  胚胎干细胞;Endeavour-1的详细资料:

公司细胞广泛用于国内院校的细胞生物学研究,作为实验项目研究。下列产品详细介绍:

产品名称

生长特性

货号

胚胎干细胞;Endeavour-1

贴壁生长

EY-X63704

细胞名称  胚胎干细胞;Endeavour-1
形态特性: 上皮细胞样

生长特性: 贴壁生长

特征特性: 该细胞属保藏,其特征特性尚未公开。

培养条件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

传代方法: 1:3传代,3-4天传1次

传代情况: C5

冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS

支原体检测: 阴性

冷冻保存细胞之方法
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法; 
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造,并经过铬酸洗液处理; 
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻; 
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率; 
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
Humantenmine

CAS No.:82354-38-9

中文名:胡蔓藤甲

分子式:C19H22N2O3

订购|咨询  凋亡相关因子(FAS) 规格: 100mg

 订购|咨询  凋亡相关因子(FAS) 规格: 200mg

四氢 订购|咨询  凋亡相关因子(FAS) 规格: 1ml

自然铜(醋煅) 订购|咨询  凋亡相关因子(FAS) 规格: 1g

木棉花 订购|咨询  凋亡相关因子配体(FASL) 规格: 2g

枳壳(橙) 订购|咨询  凋亡相关因子配体(FASL) 规格: 1g

黄连(三角叶黄连) 订购|咨询  凋亡相关因子配体(FASL) 规格: 0.5g

克罗米通 订购|咨询  凋亡相关因子配体(FASL) 规格: 100mg

宝藿苷Ⅰ 订购|咨询  凋亡相关因子配体(FASL) 规格: 约20mg/支

2,6二基4(2基基)3 订购|咨询  凋亡信号调节激酶I(ASK1) 规格: 50mg

紫河车 订购|咨询  凋亡诱导因子(AIF) 规格: 1g

邻二二酯 订购|咨询  凋亡诱导因子(AIF) 规格: 1ml

 订购|咨询  凋亡诱导因子(AIF) 规格: 200mg

依托泊苷 订购|咨询  凋亡蛋白酶激活因子1(APAF1) 规格: 100mg

火仁 订购|咨询  凋亡蛋白酶激活因子1(APAF1) 规格: 1g

路边青 订购|咨询  凋亡蛋白酶激活因子1(APAF1) 规格: 4g

莲心硷高 订购|咨询  旁血小板溶蛋白(PPL) 规格: 20mg

加兰他敏 订购|咨询  旁血小板溶蛋白(PPL) 规格: 100mg

ERRalpha  雌激素受体相关蛋白α抗体    现货供应 0.2ml Moclobemide

DCHS1  钙粘蛋白19抗体    现货供应 0.2ml Astragaloside IV

AXL/UFO  粘附相关激酶抗体    现货供应 0.1ml Astragaloside IV

Delta Catenin  δ连环蛋白/δ连环素/δ链接素抗体(δcatenin)    现货供应 0.2ml Nateglinide

OCIAD1  卵巢癌免疫反应抗原抗体    现货供应 0.2ml Nateglinide

PAGE4/GAGE9  前列腺癌相关蛋白4抗体    现货供应 0.2ml Nateglinide

PMPCB  线粒体导肽水解酶β抗体    现货供应 0.2ml "()scopolamine Nbutyl bromide "

PRAME  黑色素瘤优先表达抗原抗体    现货供应 0.2ml Tannic acid

唾液  进口、国产  英文名称:NAN  含量:BR,98%

万古  进口、国产  英文名称:VancomycinHC1  含量:4100~66000,蓝色液体,预染,9条带

王树脂  进口、国产  英文名称:Wangresin  含量:BR

斯塔  进口、国产  英文名称:RibostamycinSulfatesalt  含量:BR,<62.5μg/ml

微晶蜡  进口、国产  英文名称:Ceresin  含量:BR,85%

维多利亚蓝B  进口、国产  英文名称:BasicBlue26  含量:ACS

维生素A十六酯  进口、国产  英文名称:VitaminApalmitate  含量:IND

维生素B4  进口、国产  英文名称:VB4  含量:USP级,83%,800u/mg

维生素C酶  进口、国产  英文名称:ASO  含量:BR,300U/mg

维生素E醋酯  进口、国产  英文名称:VitaminEacetate  含量:高纯,67%
胚胎干细胞;Endeavour-1LB肉汤颗粒规格:250g用途:用于分子生物中大肠杆菌的培养

阿奇霉素检定培养基规格:BR250g详情介绍

PBS缓冲液(PH7.4)规格:250g用途:用于检测李斯特氏菌时样品的制备

1%TTC溶液规格:5支/盒用途:每支添加于100mlHB0268中

细菌总数显色培养基规格:250g用途:用于快速、准确检测菌落总数,培养24小时,细菌显红色

肠球菌肉汤规格:250g用途:用于肠球菌增菌培养
操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的  完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。

 

产品相关关键字: 胚胎干细胞 Endeavour-1
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