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产品展示   ProductsATCC细胞>>转化细胞>>胚胎干细胞;HES3.3
 
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产品名称:
胚胎干细胞;HES3.3
产品型号:
产品报价:
1360
产品特点:
胚胎干细胞;HES3.3相关产品:
6-氨基正己酸60-32-2
还原型谷胱甘肽70-18-8
3-氨基丁酸541-48-0
D-高苯丙氨酸82795-51-5
BOC-L-缬氨酸13734-41-3
  胚胎干细胞;HES3.3的详细资料:

公司细胞广泛用于国内院校的细胞生物学研究,作为实验项目研究。下列产品详细介绍:

产品名称

生长特性

货号

胚胎干细胞;HES3.3

贴壁生长

EY-X63705

细胞名称  胚胎干细胞;HES3.3
形态特性: 上皮细胞样

生长特性: 贴壁生长

特征特性: 该细胞属保藏,其特征特性尚未公开。

培养条件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

传代方法: 1:3传代,3-4天传1次

传代情况: C5

冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS

支原体检测: 阴性

冷冻保存细胞之方法
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法; 
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造,并经过铬酸洗液处理; 
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻; 
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率; 
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
Ajmalicine

CAS No.:483-04-5

中文名:阿吗

分子式:C21H24N2O3

广天仙子 订购|咨询  烟受体1(NIACR1) 规格: 1g

N异基去酯 订购|咨询  烟酰腺嘌呤二核苷(NAADP) 规格: 50mg

紫荆皮 订购|咨询  型胆受体α1(CHRNα1) 规格: 0.5g

檀香 订购|咨询  型胆受体α1(CHRNα1) 规格: 1g

土荆皮(金钱松) 订购|咨询  型胆受体α2(CHRNα2) 规格: 1g

阿昔莫司 订购|咨询  型胆受体α3(CHRNα3) 规格: 100mg

板栗壳 订购|咨询  型胆受体α4(CHRNα4) 规格: 0.5g

赖诺普利 订购|咨询  型胆受体α5(CHRNα5) 规格: 100mg

卡地平 订购|咨询  型胆受体α7(CHRNα7) 规格: 100mg

泛昔洛韦 订购|咨询  型胆受体β1(CHRNβ1) 规格: 100mg

小豆蔻明 订购|咨询  型胆受体β2(CHRNβ2) 规格: 20mg

邻磺酰 订购|咨询  型胆受体β3(CHRNβ3) 规格: 100mg

订购|咨询  海马钙蛋白(HPCA) 规格: 50mg

槐米 订购|咨询  海藻糖酶(TREH) 规格: 2g

订购|咨询  海藻糖酶(TREH) 规格: 100mg

桂枝 订购|咨询  家族性地中海热基因(MEFV) 规格: 0.5g

酰人生长激素 订购|咨询  调节激活正常T细胞表达分泌因子(RANTES) 规格: 2mg

莫司汀 订购|咨询  调节激活正常T细胞表达分泌因子(RANTES) 规格: 100mg

Plastin L  淋巴细胞胞浆蛋白LCP1抗体    现货供应 0.2ml Maraviroc

RASD2/Tumor endothelial marker 2  肿瘤血管内皮标记蛋白2抗体    现货供应 0.2ml RevalorH Trenbolone acetate

RNF43  环指蛋白43抗体    现货供应 0.2ml Silibinin

RPLP2  性核糖体蛋白P2抗体    现货供应 0.2ml Silibinin

SART3  T淋巴细胞识别的鳞状细胞癌SART3抗体    现货供应 0.2ml Ezetimibe

SDCCAG10  结肠癌抗原10抗体    现货供应 0.2ml Ezetimibe

SDCCAG8  结肠癌抗原8抗体    现货供应 0.2ml Mepivacaine HCl

SPANX  肿瘤/抗原11.3抗体    现货供应 0.1ml Amprenavir

维生素H  进口、国产  英文名称:DBiotin  含量:IND

维生素12  进口、国产  英文名称:VB12  含量:AR,75%

胃液素  进口、国产  英文名称:Pepsin(porcinestomachmucose)  含量:生物技术级,300u/mg

蜗牛酶  进口、国产  英文名称:Snailase  含量:BR,300u/mg,悬浮液

蜗牛凝集素  进口、国产  英文名称:Snailagglutinin  含量:BR,Ⅰ型,>125CDU/mg

沃来西脱蓝B  进口、国产  英文名称:OracetblueB  含量:BS

乌美司  进口、国产  英文名称:Bestatin  含量:USP级,95%,900mcg/mg

钨硅  进口、国产  英文名称:Silicotungsticacidhydrate  含量:AR,86.5%

 进口、国产  英文名称:Tungsten  含量:AR,99.7%

钨钾  进口、国产  英文名称:Potassiumtungstate  含量:AR,95%
胚胎干细胞;HES3.3营养琼脂斜面规格:250g用途:用于细菌的纯化培养

WS 琼脂规格:250g用途:用于沙门氏菌的选择性分离(GB标准)

曙红亚甲蓝琼脂培养基规格:BR250g详情介绍

knudson C 培养基规格:用途:用于兰花组织培养

松三糖规格:1g用途:微生物指示剂

平板计数琼脂(PCA)规格:250g用途:标准平板计数琼脂,含糖,用于细菌总数的测定(GB、SN标准)
操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的  完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。

 

产品相关关键字: 胚胎干细胞 HES3.3
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