细胞名称 肝癌细胞；HuH-7
形态特性: 上皮细胞样
生长特性: 贴壁生长
特征特性: 据说产甲胎蛋白，*α抗体，血浆铜蓝蛋白，纤维蛋白原，纤维粘连蛋白等。
培养条件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)优质胎牛血清，10%
传代方法: 消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
传代情况: PN5
冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测: 阴性
公司细胞广泛用于国内院校的细胞生物学研究，作为实验项目研究。下列产品详细介绍：
产品名称 | 生长特性 | 货号 |
肝癌细胞；HuH-7 | 贴壁生长 | EY-X63928 |
冷冻保存细胞之方法
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
实验要点及说明：
1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将*成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% *和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除*细胞消化液。加入含血清的 *细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用*细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除*细胞消化液后，加入含血清的*培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
碳酐酶3检测试剂盒细胞名称: 突变型Ca
NADPH;还原辅酶Ⅱ四钠盐;(美仑)FGF Receptor 1 AntibodyN-羟基哌啶
帕米膦酸Phospho-FLT3 (Tyr591) (33G6) Rabbit mAb7-硝基四氢喹啉
α,α-二基-哌啶甲Phospho-Histone H3 (Ser10) (D2C8) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 555 Conjuga)2--6-甲基*
葡萄糖氧化酶Phospho-FGF Receptor (Tyr653/654) (55H2) Mouse mAbL-天*-叔丁基酯
*(蛋清)Phospho-FGF Receptor (Tyr653/654) (55H2) Mouse mAb基
HRP;辣根过氧化物酶LATS1 (C66B5) Rabbit mAb5-硝基-2-吡啶羧酸
透明质酸酶LATS1 (C66B5) Rabbit mAb2,3,4,6-四酰氧基-alpha-D-吡喃糖溴化物
*(来源于牛肺,*抑制剂)Pan-Keratin (C11) Mouse mAb (Alexa Fluor® 555 Conjuga)2-氨基-5-硝基嘧啶
E-64,蛋白酶抑制剂Pyk2 (5E2) Mouse mAb溴吡啶-2-羧酸
阿齐沙坦酯Phospho-Ephrin B (Tyr324/329) Antibody5-溴-2-吡啶羧酸
α-*Rat (LTF-2) mAb IgG2b Isotype Control (APC Conjuga)羟甲基膦酸二酯
α-*Phospho-LKB1 (Ser428) (C67A3) Rabbit mAb2-基-5-溴甲基吡啶
酰*三锂盐DUSP10/MKP5 Antibody2-溴-9-芴酮
尿素酶,脲酶(巨豆)TRPV3 AntibodyN-叔丁氧羰基-2-甲基氨酸
蛋白酶VIIISLFN11 (D8W1B) Rabbit mAb甲基吡啶
*HGK Antibody(R)-Boc-氨基哌啶
*(标准品)AQP2 AntibodyL-2-哌啶酸
β-NADH;还原性辅酶I二钠盐Phospho-HSP90α (Thr5/7) Antibody3，5-吡唑二甲酸
苏拉明钠MSK1 (C27B2) Rabbit mAb四丁基溴化
弹性蛋白酶Phospho-Stat3 (Ser727) (D4X3C) Rabbit mAb苄基-1-哌碳酸酯
脂肪酶Phospho-Stat3 (Ser727) (D4X3C) Rabbit mAb5-吡啶-2-
木聚糖酶Phospho-CrkII (Tyr221) Antibody5-溴-2-吡啶甲
透明质酸,玻尿酸(分子量80万-150万)PD-1 (D7D5W) XP® Rabbit mAb (Mouse Specific) (Alexa Fluor® 488 Conjuga)氟吡啶-2-
透明质酸,玻尿酸,醣酸（分子量3K）CrkII Antibody氨基-5-甲基吡唑
透明质酸,玻尿酸,醣酸（分子量10K）RIP (D94C12) XP® Rabbit mAb(2-甲基)三基溴化膦
透明质酸,玻尿酸,醣酸（分子量90K）RIP (D94C12) XP® Rabbit mAb苄基哌啶
透明质酸,玻尿酸,醣酸（分子量4K）EA/UBXD8 (D8H6D) Rabbit mAb2-三氟甲酰
*Beclin-1 (D40C5) Rabbit mAb活性二氧化锰
*(标准品)Beclin-1 (D40C5) Rabbit mAb环氧溴烷
*Cas9 (7A9-3A3) Mouse mAb (Alexa Fluor® 488 Conjuga)2,二溴噻吩
过氧化氢酶(牛肝脏)Ingrin β1 (D6S1W) Rabbit mAb3,二溴噻吩
*,*酸Ingrin β1 (D6S1W) Rabbit mAb2,5-二溴噻吩
*(标准品)PHF2 (D45A2) Rabbit mAb2-甲基-2-戊酸
NAD;氧化型辅酶I;β-烟酰腺嘌呤二核苷酸水合物PHF2 (D45A2) Rabbit mAb甲基-羟甲基氧杂环丁烷
NAD;氧化型辅酶I;β-烟酰腺嘌呤二核苷酸水合物Bcl-2 (D17C4) Rabbit mAb (Mouse Preferred)D(+)-10-樟脑磺酸
β-NADP;β-烟酰腺嘌呤二核苷酸酸;氧化型辅酶 IIBcl-2 (D17C4) Rabbit mAb (Mouse Preferred)溴嘧啶
肝癌细胞；HuH-7表告依春1072-93-1中文别名：(R)-5-基-2-恶唑啉硫
英文名：Epigoitrin
CAS登录号：1072-93-1
分子式：C5H7NOS
分子量：129.18
分子结构：
外观：白色针晶()
规格：20mg/支
纯度：≥ 98%
用途：用于含量测定/鉴定/药理实验等。
提取来源：*（I. indigotica Fort.）的根
熔点：54～56℃
旋光度：+16.0°(c O．53，), ,+16.0°（c0.49,）
药理药效：主要用于抗病，治感冒。
贮存条件： 4℃冷藏、密封、避光
有效期： 2年
