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产品展示   ProductsATCC细胞>>转化细胞>>正常乳腺细胞;Hs578Bst
 
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产品名称:
正常乳腺细胞;Hs578Bst
产品型号:
产品报价:
1360
产品特点:
正常乳腺细胞;Hs578Bst相关产品:大鼠Ⅰ型前胶原ELISA检测试剂盒费用
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  正常乳腺细胞;Hs578Bst的详细资料:

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产品名称

正常乳腺细胞;Hs578Bst

生长特性

贴壁生长

货号

EY-X63491

细胞名称  正常乳腺细胞;Hs578Bst
形态特性: 成纤维细胞

生长特性: 贴壁生长

特征特性: Hs578Bst来源于一个浸润性导管癌(Hs578T的起源)旁的正常乳房组织。Hs578Bst可能是肌上皮起源的,因为它有与体内的肌上皮中见到的类似的微丝和丛生的胞饮液泡。未观察到桥粒,没有雌激素受体蛋白,未检测到内生病毒。

培养条件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)优质胎牛血清,10%;30ng/mlEGF

传代方法: 消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。

传代情况: P(10+5)

冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS

支原体检测: 阴性

产品特点:
1、 使用方便:不需昂贵设备。
2、 可以处理各种细菌菌体,包括新鲜菌液和冰冻菌体。
3、 将蛋白提取的时间缩短至30分钟-1小时。
4、 采用温和的中性裂解组分,保持蛋白活性。
5、 含蛋白稳定剂,提取的蛋白稳定。
6、 紫外检测蛋白浓度时,背景干扰低。
7、 蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含6种独立的蛋白酶抑制剂;每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性,包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本试剂盒中不有EDTA,与金属螯和层析等兼容。 
培养操作步骤
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布; 
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片); 
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时; 
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中; 
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法; 
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造,并经过铬酸洗液处理; 
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻; 
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率; 
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
操作流程:
1.1主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%胰酶消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞,以0.25%胰酶消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ,计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。
rmIL-17F, CF (25 UG)细胞名称: 小鼠淋巴瘤细胞;L-bFGF-5 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

rmIL-17F (25 UG)细胞名称: 小鼠杂交瘤细胞;

CHAPSO;[(胆固氨基)二甲基氨基]-2-羟基-1-磺酸IRS-1 (D23G12) Rabbit mAb1,12-二氨基十二烷
二硫赤藓(D);1,二硫代赤藓VEGF Receptor 3 (C82A2) Rabbit mAbL-谷氨酸双苄酯对甲磺酸盐
N-硝基-L-精氨酸甲酯YAP/TAZ (D24E4) Rabbit mAb (Biotinylad)1,6-二溴芘
N-甲酰-L-酪氨酸酯(BE)PSD95 (D74D3) XP® Rabbit mAbS-三甲基-L-半胱氨酸
AEBSF丝氨酸抑制剂PSD95 (D74D3) XP® Rabbit mAb(R)-吡咯烷
AEBSF(进分)α-Smooth Muscle Actin (D4K9N) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjuga)2-氟-5-甲
盐酸贝他定(进口)Drosha (D30F3) Rabbit mAb9-双环[3.3.1]壬烷
邻菲啰啉盐酸盐,一水MeCP2 (D4F3) XP® Rabbit mAb (PE Conjuga)1,双(2,6-二异基)-4,5-二氢咪唑 四氟酸盐
膦酰二肽钠eIF3A (D51F4) XP® Rabbit mAb2,4,6-三氟甲酸
癸基喃葡萄糖;癸基吡喃葡萄糖苷eIF3A (D51F4) XP® Rabbit mAb2-氨基二甲酮
德罗特韦(GSK-1349572,DTG)eIF3H (D9C1) XP® Rabbit mAb2-氨基-酚
十二烷基吡喃葡萄糖苷;月桂酰基喃葡萄糖HIF-1β/ARNT (C15A11) Rabbit mAb氨基-酚
羟基纤维素(20000~30000 mpa.s)Acetyl-Histone H2B (Lys20) (D7O9W) Rabbit mAb酸钠
羟基纤维素(5500-6500 mpa.s)Atg3 Antibody5-氨基-2-溴甲酸
羟基纤维素(40~60 mpa.s)Atg3 Antibody5-氨基-2-甲酸
异基-β-D-硫代半糖苷(IPTG)IKKε (D61F9) XP® Rabbit mAb氨基-甲氧基甲酸
甘露糖;D-甘露糖IKKε (D61F9) XP® Rabbit mAb2-氨基-5-酚
D-甘露糖(标准品)CTCF (D1A7) XP® Rabbit mAb甲
N-辛酰基-N-甲基葡糖(MEGA-8)Topoisomerase IIα (D10G9) XP® Rabbit mAb (PE Conjuga)1-氨基-2-甲基-2-
N-癸酰基-N-甲基葡糖(MEGA-10)CTCF (D31H2) XP® Rabbit mAb3,环氧四
辛基-β-D-硫代吡喃葡萄糖苷CTCF (D31H2) XP® Rabbit mAb2-甲基-呋喃硫
D-绵子糖五水;蜜三糖五水Streptavidin (Sepharose® Bead Conjuga)3,(亚甲基二氧)
D-山梨Mouse IgG (Sepharose® Bead Conjuga)氧化环己
n-辛基-β-D-吡喃葡萄糖苷(OGP)CNOT2 (D8Z8P) Rabbit mAbN-Boc-1,2,5,6-四氢吡啶-酸频哪酯
L-核糖Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control (Sepharose® Bead Conjuga)D-阿拉伯糖
L-核糖(标准品)Phospho-HDAC4 (Ser632)/HDAC5 (Ser661)/HDAC7 (Ser486) Antibody十八烷基异酸酯
2-脱氧-L-核糖Phospho-Stathmin (Ser38) Antibody2-甲基基
甲基伞形酮-β-D-木糖苷NCoR1 (E4S4N) Rabbit mAb4,5,6,7-四氢噻吩[3,2-c]吡啶盐酸盐
2-脱氧-D-核糖Rad50 Antibody邻/对甲磺酸甲酯
D-半糖(标准品)Rad50 Antibody基肼盐酸盐
D-半糖Phospho-53BP1 (Thr543) Antibody三氮唑
盐酸肼;双盐酸肼Phospho-NuMA (Ser395) Antibody6,7-二甲氧基-2,喹唑啉二酮
羟基灰石RhoC (D40E4) Rabbit mAb方酸
羟基纤维素(粘度11250-21000mPas)RhoC (D40E4) Rabbit mAb二异尿酸钠
羟基纤维素Id2 (D39E8) Rabbit mAbFmoc-甘氨酸
羟基纤维素(30000 mpa.s)Cytokine Receptor Common beta-Chain Antibody吡 rmIL-17 RD/SEF, CF (50 UG)细胞名称: 小鼠杂交瘤细胞;HBKC-48 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

正常乳腺细胞;Hs578Bst人软骨糖蛋白39(HCgp-39)ELISA试剂盒NeuronalChemorepellentSlit2ELISAKit产品规格:48T/96T。

人溶酶体相关膜蛋白2(HLAMP-2)ELISA试剂盒NFELISAKit产品规格:48T/96T。

人胶原吡啶交联(PYD)ELISA试剂盒NF-κBp65ELISAKit产品规格:48T/96T。

人脱氧胶原吡啶交联(DPD)ELISA试剂盒NF-κBp65ELISAKit产品规格:48T/96T。

人羟基胶原吡啶交联(OH-PYD)ELISA试剂盒NF-κBp65ELISAKit产品规格:48T/96T。

人螺旋肽(HelicalPeptide)ELISA试剂盒NF-κBp65ELISAKit产品规格:48T/96T。

Ⅱ型胶原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)ELISA试剂盒NGALELISAKit产品规格:48T/96T。

人基质裂解蛋白(MAT)ELISA试剂盒NGALELISAKit产品规格:48T/96T。

产品相关关键字: 正常乳腺细胞 Hs578Bst
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