公司细胞广泛用于国内院校的细胞生物学研究,作为实验项目研究。下列产品详细介绍:
产品名称 | 生长特性 | 货号 |
发绿色荧光的小鼠胚胎干细胞;G1 | 贴壁生长 | EY-X63714 |
细胞名称 发绿色荧光的小鼠胚胎干细胞;G1
形态特性: 上皮细胞样
生长特性: 贴壁生长
特征特性: 该细胞属保藏,其特征特性尚未公开。
培养条件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
传代方法: 1:3传代,3-4天传1次
传代情况: C5
冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测: 阴性
冷冻保存细胞之方法
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
Gelsevirine
CAS No.:38990-03-3
中文名:钩吻绿
分子式:C21H24N2O3
芦荟苷 订购|咨询 眼皮肤白病Ⅱ蛋白(OCA2) 规格: 20mg
柴胡皂苷D 订购|咨询 眼质蛋白(OCLM) 规格: 20mg
长春花 订购|咨询 野色基因相关蛋白(AGRP) 规格: 20mg
白术内酯Ⅰ 订购|咨询 野色基因相关蛋白(AGRP) 规格: 20mg
白桦脂醛 订购|咨询 野色基因相关蛋白(AGRP) 规格: 20mg
补骨脂素 订购|咨询 晚期糖基终末产物(AGE) 规格: 20mg
十六 订购|咨询 晚期糖基终末产物受体(AGER) 规格: HPLC≥98%;20mg/vial
香蒲新甙 订购|咨询 晚期糖基终末产物受体(AGER) 规格: HPLC≥98%,20mg/vial
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异钩藤 订购|咨询 唾液酯酶(SIAE) 规格: HPLC≥98%;20mg/vial
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白果内酯 订购|咨询 唾液转移酶4B(SIAT4B) 规格: HPLC≥98%,20mg/vial
花青素 订购|咨询 唾液转移酶4C(SIAT4C) 规格: HPLC≥98%,5mg/vial
去氢钩藤 订购|咨询 唾液转移酶7A(SIAT7A) 规格: HPLC≥98%,20mg/vial
SPNS1 SPNS1抗体 现货供应 0.2ml Sodium ferulic
beta Bax/BCL2 associated X protein BCL2相关X蛋白抗体 现货供应 0.2ml Cefditoren pivoxil
Nucleolar protein 3/Apoptosis repressor with CARD 核仁蛋白3抗体 现货供应 0.2ml Cefditoren pivoxil
CARD10 BCL10结合蛋白和激活核转录因子抗体 现货供应 0.2ml Pyrazinamide
CARD12 凋亡加强结构域蛋白12抗体 现货供应 0.2ml Pyrazinamide
CARD14 凋亡加强结构域蛋白14抗体 现货供应 0.2ml Demeclocycline hydrochloride
CARD15 凋亡加强结构域蛋白15抗体 现货供应 0.2ml Demeclocycline hydrochloride
CARD4 凋亡加强结构域蛋白4抗体 现货供应 0.2ml NMethyl Paroxetine
锌片 进口、国产 英文名称:Zinc 含量:BR,95%
新生 进口、国产 英文名称:NovobiocinSodiumSalt 含量:BR,95%
新铜试剂 进口、国产 英文名称:Cuprizon 含量:AR,99%
猩红S 进口、国产 英文名称:PonceauS 含量:CP,500%
胸苷二 进口、国产 英文名称:TMP 含量:植物细胞培养级,99%
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百里香酚蓝 进口、国产 英文名称:Bromothymolbluesodiumsalt 含量:高纯,98%
代十二基*铵 进口、国产 英文名称:DTAB 含量:IND
酚兰 进口、国产 英文名称:BPB 含量:CP,98%
酚兰 进口、国产 英文名称:Bromophenolbluesodiumsalt 含量:CP,98%
发绿色荧光的小鼠胚胎干细胞;G1大肠杆菌/大肠菌群液体显色培养基规格:1000ml用途:用于快速、准确同时检测大肠杆菌和大肠菌群,培养24小时,大肠杆菌显蓝色荧光,大肠菌群显蓝色
萋 - 尼氏染色液规格:5ml/支*6用途:用于细菌抗染色
煌绿琼脂(BGA)规格:250g用途:用于沙门氏菌的分离培养
乙基紫叠氮钠肉汤规格:250g用途:用于链球菌的增菌培养
布氏肉汤规格:或加琼脂配制布氏琼脂详情介绍
艾格琼脂规格:250g用途:用于过程中无菌监测
操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除细胞消化液。加入含血清的 *细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除细胞消化液后,加入含血清的*培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。