实验要点及说明：
1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法； 
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理； 
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻； 
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率； 
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
公司细胞广泛用于国内院校的细胞生物学研究，作为实验项目研究。下列产品详细介绍：

​
细胞名称  小鼠胚胎成纤维细胞；C3H10T1/22A6
形态特性: 成纤维细胞样

生长特性: 贴壁生长

特征特性: 1972年从C3H小鼠胚胎细胞中分离建立；在同系小鼠体内不能成瘤，未发现自发转化；化学制剂很容易引起该细胞发生转化，建议只用5~15代的细胞。

培养条件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS

传代方法: 2000cells/cm2传代；2~3天换液1次。

传代情况: 不详

冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS

支原体检测: 培养法（-）
冷冻保存细胞之方法
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除细胞消化液。加入含血清的  *细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除细胞消化液后，加入含血清的*培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
小鼠杂交瘤细胞；3H8H10形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 半贴壁生长Anti-CD44 Polyclonal Antibody

小鼠杂交瘤细胞；2H7形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 半贴壁生长Anti-CLU Polyclonal Antibody

疱疹病单抗杂交瘤细胞；C5Mcab形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 半贴壁生长Anti-CD274 Polyclonal Antibody

小鼠杂交瘤细胞；1F8G5D6D2形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 半贴壁生长Anti-FEN1 Polyclonal Antibody

小鼠杂交瘤细胞；2A3形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 半贴壁生长Anti-SMS Polyclonal Antibody

小鼠杂交瘤细胞；IE6-A2形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 半贴壁生长Anti-FABP4 Polyclonal Antibody

抗人大肠癌单抗杂交瘤细胞；CYL-1形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 半贴壁生长Anti-CYP7A1 Polyclonal Antibody

抗人大肠癌单抗杂交瘤细胞；CYL-4形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 半贴壁生长Anti-CAMK2G Polyclonal Antibody

抗人大肠癌单抗杂交瘤细胞；CYL-2形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 半贴壁生长Anti-PDK4 Polyclonal Antibody

抗人大肠癌单抗杂交瘤细胞；CYL-3形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 半贴壁生长Anti-KT3 tag Monoclonal Antibody

抗人大肠癌单抗杂交瘤细胞；CYL-5形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 半贴壁生长Anti-Socs 2 Polyclonal Antibody

小鼠杂交瘤细胞；1H7F8C12E5形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 半贴壁生长Anti-SIRT1 Polyclonal Antibody

小鼠杂交瘤细胞；1D5H12F11F8形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 半贴壁生长Anti-SERPINB8 Polyclonal Antibody

小鼠杂交瘤细胞；3D10形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 半贴壁生长Anti-ACRS Polyclonal Antibody

抗人pirin单抗杂交瘤细胞；IIIA3bC1E12D1形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 半贴壁生长Anti-LEP Polyclonal Antibody

抗人EIFIAY单抗杂交瘤细胞；B4B5C5形态特性: 淋巴母细胞样生长特性: 半贴壁生长Anti-CD59 Polyclonal Antibody
小鼠胚胎成纤维细胞；C3H10T1/22A6大鼠高迁移率族蛋白1(HMG-1)ELISA试剂盒CREBELISAKit产品规格:48T/96T。

大鼠脱氢表雄(DHEA)ELISA试剂盒CrELISAKit产品规格:48T/96T。

大鼠脱氢表雄S7(DHEA-S7)ELISA试剂盒CRELISAKit产品规格:48T/96T。

大鼠性激素结合球蛋白(SHBG)ELISA试剂盒CrELISAKit产品规格:48T/96T。

大鼠绒毛膜β(β-CG)ELISA试剂盒CRELISAKit产品规格:48T/96T。

大鼠抑制素A(INH-A)ELISA试剂盒CrELISAKit产品规格:48T/96T。

大鼠甲状腺球蛋白(TG)ELISA试剂盒CrELISAKit产品规格:48T/96T。

大鼠水通道蛋白2(AQP-2)ELISA试剂盒CRELISAKit产品规格:48T/96T。