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产品名称 | 类成纤维细胞系;CNLMG-B5538SKIN |
生长特性 | 贴壁生长 |
货号 | EY-X63695 |
细胞名称 类成纤维细胞系;CNLMG-B5538SKIN
形态特性: 成纤维细胞样
生长特性: 贴壁生长
特征特性: 该细胞属保藏,其特征特性尚未公开。
培养条件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS
传代方法: 1:3传代,3-4天传1次
传代情况: C8
冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测: 阴性
产品特点:
1、 使用方便:不需昂贵设备。
2、 可以处理各种细菌菌体,包括新鲜菌液和冰冻菌体。
3、 将蛋白提取的时间缩短至30分钟-1小时。
4、 采用温和的中性裂解组分,保持蛋白活性。
5、 含蛋白稳定剂,提取的蛋白稳定。
6、 紫外检测蛋白浓度时,背景干扰低。
7、 蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含6种独立的蛋白酶抑制剂;每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性,包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本试剂盒中不有EDTA,与金属螯和层析等兼容。
培养操作步骤 :
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片*浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
操作流程:
1.1主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生的细胞,以0.25%消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ,计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生的细胞用消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。
Harmaline
CAS No.:304-21-2
中文名:骆驼蓬
分子式:C13H14N2O
大黄素;1,8二羟基3氧基 订购|咨询 脂肪酶K(LIPK) 规格: HPLC≥98%,20mg/支
菊苣 订购|咨询 脂肪酶M(LIPM) 规格: HPLC≥98%,20mg/支
桑皮苷A 订购|咨询 脂肪酶N(LIPN) 规格: HPLC≥98%,20mg/支
龙胆苦苷 对照品 订购|咨询 脂肪去饱和酶1(FADS1) 规格: 20mg;97.3%
对基 对照品 订购|咨询 脂肪去饱和酶1(FADS1) 规格: 100mg
莫能菌素 对照品 订购|咨询 脂肪去饱和酶2(FADS2) 规格: 150mg
抗A,抗B血型定型试剂(单克隆抗体) 订购|咨询 脂肪去饱和酶2(FADS2) 规格:
猪去氧胆;Hyodeoxycholic 订购|咨询 脂肪去饱和酶3(FADS3) 规格: 100mg
异香草;Isovanillic Aci 订购|咨询 脂肪合酶(FASN) 规格: 20mg
一枝蒿庚素;Bullatine G;so 订购|咨询 脂肪合酶(FASN) 规格: 10mg
印;Indaconitone 订购|咨询 脂肪合酶(FASN) 规格: 20mg
异李素;Isorhamnetin 订购|咨询 脂肪合酶(FASN) 规格: 20mg
a细辛;aAsarone 订购|咨询 脂肪转运蛋白5(FATP5) 规格: 20mg
细辛脂素;()asarinin 订购|咨询 脂肪转运蛋白5(FATP5) 规格: 20mg
无水柠檬;Citric acid 订购|咨询 脂肪转移酶1(LIPT1) 规格: 100mg
10脱基巴卡III;10Dea 订购|咨询 脂肪转移酶2(LIPT2) 规格: 20mg
苏木素;Hematoxylin 订购|咨询 脂素1(LPIN1) 规格: 20mg
苏丹红Ⅲ;Sudan III;Solve 订购|咨询 脂素1(LPIN1) 规格: 20mg
CCDC5 卷曲螺旋结构域蛋白5抗体 现货供应 0.2ml Tetraxetan/DOTA/1,4,7,10Tetraazacyclododecane1,4,7,10tetraacetic acid
BMP9 骨形态发生蛋白9抗体 现货供应 0.2ml Lamivudine
BMPER BMP内皮细胞调节蛋白抗体 现货供应 0.2ml Lamivudine
Angiotensin II type 1A receptor 血管紧张素Ⅱ1A型受体抗体 现货供应 0.1ml Trifluop dihydrochloride
Entactin/Nidogen 巢蛋白1抗体 现货供应 0.2ml Trifluop dihydrochloride
Cyclin M2/NM2 周期素M2抗体 现货供应 0.2ml Corticosterone
FRS2 成纤维细胞生长因子受体底物2抗体 现货供应 0.2ml Corticosterone
FER/TYK3 酪蛋白激酶3抗体 现货供应 0.2ml Disulfiram
性酶 进口、国产 英文名称:ACP 含量:生物技术级,99%
性锰 进口、国产 英文名称:Manganousdihydrogenphosphate 含量:CP
性罗丹明B 进口、国产 英文名称:LissaminerhodamineB 含量:BS
性绿5 进口、国产 英文名称:LightgreenSFyellowish 含量:AR,404.5%
性绿O 进口、国产 英文名称:NaphtholgreenB 含量:AR,98%
性紫43 进口、国产 英文名称:Alizarinviolet3B 含量:FMP
随机引物 进口、国产 英文名称:Randomprimers 含量:BR,40u/ul
梭菌蛋白酶 进口、国产 英文名称:ClostripainfromClostridiumhistolyticum 含量:BR
进口、国产 英文名称:Carbenicillindisodiumsalt 含量:BR
进口、国产 英文名称:SCarboxymethylLCysteine 含量:BR,99%
类成纤维细胞系;CNLMG-B5538SKIN氨基脱羧酶对照规格:1ml*20用途:用于生化鉴定
解磷细菌培养基(有机磷细菌培养基)规格:250g用途:用于利用有机磷细菌的分离培养
赖氨脱羧酶培养基规格:5g用途:生化培养基,赖氨脱羧酶试验
药敏纸片规格:15μg/片,20片/瓶用途:用于药物体外敏感性试验
醋盐琼脂规格:250g用途:用于细菌醋盐试验
BCYE-Cys琼脂基础规格:可溶性焦磷铁用途:0.025g每支含量