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产品展示   ProductsATCC细胞>>转化细胞>>胚胎眼Tenon's囊成纤维细胞;HFTF
 
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产品名称:
胚胎眼Tenon's囊成纤维细胞;HFTF
产品型号:
产品报价:
1360
产品特点:
胚胎眼Tenon's囊成纤维细胞;HFTF相关产品:
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  胚胎眼Tenon's囊成纤维细胞;HFTF的详细资料:

公司细胞广泛用于国内院校的细胞生物学研究,作为实验项目研究。下列产品详细介绍:

产品名称

生长特性

货号

胚胎眼Tenon's囊成纤维细胞;HFTF

贴壁生长

EY-X63306

细胞名称  胚胎眼Tenon's囊成纤维细胞;HFTF
形态特性: 成纤维细胞样

生长特性: 贴壁生长

特征特性: 北京眼科研究所建系。

培养条件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS

传代方法: 1:2~1:3传代;3~4天1次。

传代情况: P9

冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS

支原体检测: 培养法(-)

冷冻保存细胞之方法
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法; 
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造,并经过铬酸洗液处理; 
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻; 
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率; 
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

EHDAB;十六烷基二甲基基溴化铵eIF4B Antibody2--氟吡啶
十二烷基二甲基基溴化铵eIF4B Antibody三氟磺酸酮
十四烷基二化铵Mouse (MOPC-21) mAb IgG1 Isotype Control (redFluor™ 710 Conjuga)甲氧基-5-三氟
HDBAC;十六烷基二化铵Malic Enzyme 2 (E1N3F) XP® Rabbit mAb三氟甲
十烷基三甲基化铵Grp75 (D13H4) XP® Rabbit mAb三基酸叔丁酯
辛基三甲基化铵;八烷基三甲基化铵Grp75 (D13H4) XP® Rabbit mAb氟-羟基甲酸
2-溴基三甲基溴化铵Calmodulin (D1F7J) Rabbit mAb对氟
溴基三甲基溴化铵(BPTAB)eIF2B-ε Antibody2--6-并噻唑
十二烷基二化铵Phospho-eIF2α (Ser51) (119A11) Rabbit mAb2-溴-氟磺酰
DDAB;双十烷基二甲基溴化铵Phospho-eIF2α (Ser51) (119A11) Rabbit mAb溴-氟磺酰
双十二烷基二甲基溴化铵FLI1 (D7N5M) Rabbit mAb(1R,2R)-1,2-二基二
L-赖氨酸DNMT3A (D23G1) Rabbit mAb2-亚甲基-1,
L-赖氨酸SimpleChIP®  NRIP1 Upstream Primers氨酰基酸
L-色氨酸EpCAM Antibody4,6-二甲基-2-甲磺酰基嘧啶
L-色氨酸(标准品)Phospho-BLNK (Tyr96) AntibodyH-HIS(TRT)-OH
L-丝氨酸Phospho-BLNK (Tyr96) Antibody(5-甲基异恶唑-基)甲
L-丝氨酸(标准品)Cdc7 Antibody4,二氟酰酸酯
L-精氨酸(标准品)CDC37 (V367) Antibody2-氟-5-三氟酸
L-精氨酸SNAT1/SLC38A1 (D9L2P) Rabbit mAbBoc-1-氨基环戊烷羧酸
L-精氨酸盐酸盐DIDO1 Antibody氟甲
DL-精氨酸RanGAP1 (D2T7T) Rabbit mAb2-(三酰)吡咯
L-缬氨酸NCAM (CD56) Antibody三氟化-二甲络合物
L-异亮氨酸(标准品)NEDD4 (C5F5) Rabbit mAb1-(2-甲氧基)哌
L-异亮氨酸Notch1 (D1E11) XP® Rabbit mAb二氟溴酸
L-苏氨酸CDK10 (D8Z7Z) Rabbit mAb氨基甲酰
DL-苏氨酸Phospho-Tuberin/TSC2 (Thr1462) Antibody1,1,1-三三氟烷
L-氨酸Tuberin/TSC2 Antibody五氟烷
L-天冬酰;L-天冬酰一水  Phospho-Tuberin/TSC2 (Tyr1571) Antibody2-氨基-3,5-二溴吡啶
L-甲硫氨酸(标准品)Phospho-Tuberin/TSC2 (Ser939) Antibody全氟己基烷
L-甲硫氨酸Phospho-Tuberin/TSC2 (Ser939) Antibody1-叔丁基-
L-胱氨酸HIF-1α (D1S7W) XP® Rabbit mAb3,5-二甲基哌啶
L-胱氨酸盐酸盐HIF-1α (D1S7W) XP® Rabbit mAb4,5-二甲基噻唑
L-半胱氨酸Phospho-Tuberin/TSC2 (Ser1254) Antibody氨基-羟基磺酰
L-半胱氨酸(标准品)Phospho-Tuberin/TSC2 (Thr1462) (5B12) Rabbit mAb2,3,4,5-四甲氧
L-半胱氨酸盐酸盐,一水Phospho-Tuberin/TSC2 (Thr1462) (5B12) Rabbit mAb1,5-二-戊酮
DL-半胱氨酸CDC37 (V297) Antibody2,5-二甲氧基

性: 上皮细胞样生长特性: 贴壁生长Anti-DSC2 Polyclonal Antibody
胚胎眼Tenon's囊成纤维细胞;HFTF大鼠脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA试剂盒CTELISAKit产品规格:48T/96T。

大鼠内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA试剂盒CTELISAKit产品规格:48T/96T。

大鼠诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)ELISA试剂盒CTGFELISAKit产品规格:48T/96T。

大鼠一氧化氮合成酶(NOS)ELISA试剂盒CTGFELISAKit产品规格:48T/96T。

大鼠抗IVIgG抗体ELISA试剂盒CTGFELISAKit产品规格:48T/96T。

大鼠抗IgE受体抗体ELISA试剂盒CTLA-4ELISAKit产品规格:48T/96T。

大鼠胰岛素原(PI)ELISA试剂盒cTn-ⅠELISAKit产品规格:48T/96T。

大鼠αL岩藻糖苷酶(AFU)ELISA试剂盒cTn-ⅠELISAKit产品规格:48T/96T。
操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的  完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。

 

产品相关关键字: 胚胎眼Tenon's 囊成纤维细胞 HFTF
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