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褐球固氮菌说明书
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 褐球固氮菌说明书

 Azotobacter chroococcum

 EY-J963217

资源名称: 褐球固氮菌

种属: Azotobacter chroococcum

分离基物: 土壤

提供形式: 冻干物

安全等级: 1

模式菌株: no

应用领域: 研究;生产。固氮菌,细菌肥料。

培养基: 固氮培养基(Azotobacter Medium):酵母提取物 0.5g,甘露醇 20.0g,KH2PO4 0.2g,K2HPO4 0.8g,MgSO4.7H2O 0.2g,CaSO4·2H2O 0.1g,FeCl3 微量,Na2MoO4·2H2O 微量,琼脂 15.0g,蒸馏水 1.0L,pH7.2。

生长条件: 25~28℃,好氧。

生长特性: 卵圆形细胞,Gˉ ,常成对。周生鞭毛运动,无芽孢。好氧,化能异养型。接触酶阳性。利用淀粉、甘露醇。能利用盐、氨和氨基酸作为氮源。在含一种有机碳源的无氮培养基中能固定分子氮。

存储条件: 真空冷冻干燥法


低温存法:
①简单保存法,将琼脂斜面孢子培养物、菌丝悬浮液以及由麸皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培养物置于4℃冰箱保存,保存时间不超过1~2个月,若将谷物原料制备的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蜡,以隔绝外界空气和水汽,保持时间可达3~4个月;②液氮超低温保存法,将生长稳定期的细胞悬浮在10%甘油或其他低冰点液体中,密封于安瓿管内,然后控制冷却速度,使安瓿管温度逐步下降至 -35℃时,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多数微生物如病毒、噬菌体、多种细菌、放线菌、酵母和原虫、特别是一些用冷冻干燥法有困难的微生物,都可用此法保存。
微生物菌种的培养:
⒈ 孢子制备
⑴ 放线菌孢子的制备
一般采用琼脂斜面培养基,培养基中含有一些适合产孢子的营养成分,如麸皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些无机盐等。碳源和氮源不要太丰富(碳源约为1%,氮源不超过0.5%),碳源丰富容易造成酸性的营养环境,不利于放线菌孢子的形成,氮源丰富则有利于菌丝繁殖而不利于孢子形成。一般情况下,干燥和限制营养可直接或间接诱导孢子形成。放线菌斜面的培养温度大多数为28 ℃,少数为37 ℃,培养时间为5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制备 
霉菌的孢子培养,一般以大米、小米、玉米、麸皮、麦粒等天然农产品为培养基。这是由于这些农产品中的营养成分较适合霉菌的孢子繁殖,而且这类培养基的表面积较大,可获得大量的孢子。霉菌的培养一般为25~28 ℃,培养时间为4~14天。
⒉ 种子制备
⑴ 摇瓶种子制备 
摇瓶种子进罐,常采用母瓶、子瓶两级培养,有时母瓶种子也可以直接进罐。种子培养基要求比较丰富和完全,并易被菌体分解利用,氮源丰富有利于菌丝生长。原则上各种营养成分不宜过浓,子瓶培养基浓度比母瓶略高,更接近种子罐的培养基配方。
⑵ 种子罐种子制备 
种子罐种子制备的工艺过程,因菌种不同而异,一般可分为一级种子、二级种子和三级种子的制备。孢子(或摇瓶菌丝)被接入到体积较小的种子罐中,经培养后形成大量的菌丝,这样的种子称为一级种子,把一级种子转入发酵罐内发酵,称为二级发酵。如果将一级种子接入体积较大的种子罐内,经过培养形成更多的菌丝,这样制备的种子称为二级种子,将二级种子转入发酵罐内发酵,称为三级发酵。同样道理,使用三级种子的发酵,称为四级发酵。
Yarrowia│lipolytica 中文名称:解脂耶氏酵母Yarrowia│lipolytica提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no应用领域:石油发酵制柠檬及异柠檬。培养方法培养基:CM0077生长条件:28-30℃存储条件:真空冷冻干燥法;定期移植法 纯度:≥98%

Aspergillus│candidus 中文名称:白曲霉Aspergillus│candidus提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no应用领域:酿酒糖化菌。培养方法培养基:CM0076生长条件:28-30℃存储条件:真空冷冻干燥法;定期移植法 纯度:98%

Monascus│anka 中文名称:红曲红曲菌Monascus│anka提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no应用领域:生产红色素。培养方法培养基:CM0085生长条件:28-30℃存储条件:真空冷冻干燥法;定期移植法 纯度:98%

Lactobacillus│Coryniformis subsp. coryniformis 中文名称:棒状乳杆菌棒状亚种Lactobacillus│Coryniformis subsp. coryniformis分离基物:泡菜(萝卜,豇豆,白菜,黄瓜)提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no应用领域:生产泡菜、乳制品、果蔬制品等。培养方法培养基:CM0006生长条件:37℃存储条件:真空冷冻干燥法;定期移植法 纯度:99%

Lactobacillus│salivarius subsp. salicinuus 中文名称:唾液乳杆菌杨素亚种Lactobacillus│salivarius subsp. salicinuus分离基物:泡菜(萝卜,木瓜)提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no应用领域:发酵生产泡菜、果蔬制品、饲料等。培养方法培养基:CM0006生长条件:37℃存储条件:真空冷冻干燥法;定期移植法 纯度:99%

Lactobacillus│viridescens 中文名称:绿色乳杆菌Lactobacillus│viridescens分离基物:泡菜(木瓜,黄瓜,萝卜,苦耳瓜)提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no应用领域:发酵制泡菜、果蔬制品、饲料等。培养方法培养基:CM0006生长条件:30~32℃存储条件:真空冷冻干燥法;定期移植法 纯度:99%

Propionibacrium│jensenii 中文名称:詹氏丙杆菌Propionibacrium│jensenii分离基物:窖泥提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no应用领域:产丙,酿酒、降酯用。培养方法培养基:CM0286生长条件:30℃存储条件:真空冷冻干燥法;定期移植法 纯度:98%

Saccharomyces│ellipsoideus 中文名称:椭圆酵母Saccharomyces│ellipsoideus提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:生产甘油。培养方法培养基:CM0077生长条件:28℃存储条件:真空冷冻干燥法;定期移植法 纯度:1.00mg/ml
褐球固氮菌说明书MR-VP培养基人表皮角质细胞-新生原代上皮细胞培养特制添加剂AGEs cool article(advanced glycosylation end products cool article)  晚期糖基化终末产物蛋白对照品

察氏培养基人表皮角质细胞-原代内皮细胞培养特制添加剂ET-1(Endothelin-1)  内皮素-1(蛋白多肽 活性蛋白)

结晶紫中性红胆盐琼脂VRBA人表皮角质细胞-胎儿原代平滑肌细胞培养特制添加剂GRGDS peptide  粘附多肽GRGDS

结晶紫中性红胆盐琼脂人表皮黑色素细胞-浅色素原代成纤维细胞培养特制添加剂PACAP(1-38 Peptide)  腺苷环化酶激活肽 1-38(全蛋白)

产培养基人表皮黑色素细胞-中色素原代心肌细胞培养特制添加剂MBP(Myelin Basic Protein, MBP 68-86)  髓鞘性蛋白(多肽抗原)

西蒙氏枸橼盐琼脂人表皮黑色素细胞-深色素原代表皮角化细胞培养特制添加剂Bursin  囊素三肽/三肽囊素/鸡法氏囊三肽

肠道菌计数琼脂(VRBDA)人表皮黑色素细胞-原代系膜细胞培养特制添加剂NPY ( Neuropeptide Y)1-36  神经肽 Y(1-36多肽)

菌种保存培养基人表皮黑色素细胞-胎儿原代肝实质细胞培养特制添加剂Leupeptin   亮抑酶肽
综合微生物的培养方法,包括以下步骤:
1)前期准备:(A)灭菌处理;(B)制备Biolite水;(C)检查设备和材料;
2)按比例配制培养材料;
3)导入曝气,进行繁殖培养;
4)取液观察;(a)取液;(b)稀释菌液;(c)平板培养;
5)分离并检测;
6)取液储存;通过该综合微生物培养方法简单可操作性强,培养的综合微生物均在3代以内,菌类稳定不发生突变,且繁殖快速。

 

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