综合微生物的培养方法,包括以下步骤:
(1)前期准备:(A)灭菌处理;(B)制备Biolite水;(C)检查设备和材料;
(2)按比例配制培养材料;
(3)导入曝气,进行繁殖培养;
(4)取液观察;(a)取液;(b)稀释菌液;(c)平板培养;
(5)分离并检测;
(6)取液储存;通过该综合微生物培养方法简单可操作性强,培养的综合微生物均在3代以内,菌类稳定不发生突变,且繁殖快速。
规格参数:
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
青春双歧杆菌规格 | Bifidobacterium adolescentis | EY-J963222 |
资源名称: 青春双歧杆菌
种属: Bifidobacterium adolescentis
提供形式: 冻干物
安全等级: 1
模式菌株: yes
培养基: BBL液体培养基:蛋白胨 15.0g,葡萄糖 20.0g,酵母浸膏 20.g,可溶性淀粉 0.5g, 5.0g,L-半 0.5g,番茄浸粉 5.0g,肝浸粉 2.0g,吐温80 1.0g,蒸馏水1L,pH6.6-7.0。115℃,20min。
生长条件: 37℃,厌氧
存储条件: 真空冷冻干燥法
低温存法:
①简单保存法,将琼脂斜面孢子培养物、菌丝悬浮液以及由麸皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培养物置于4℃冰箱保存,保存时间不超过1~2个月,若将谷物原料制备的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蜡,以隔绝外界空气和水汽,保持时间可达3~4个月;②液氮超低温保存法,将生长稳定期的细胞悬浮在10%甘油或其他低冰点液体中,密封于安瓿管内,然后控制冷却速度,使安瓿管温度逐步下降至 -35℃时,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多数微生物如病毒、噬菌体、多种细菌、放线菌、酵母和原虫、特别是一些用冷冻干燥法有困难的微生物,都可用此法保存。
微生物菌种的培养:
⒈ 孢子制备
⑴ 放线菌孢子的制备
一般采用琼脂斜面培养基,培养基中含有一些适合产孢子的营养成分,如麸皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些无机盐等。碳源和氮源不要太丰富(碳源约为1%,氮源不超过0.5%),碳源丰富容易造成酸性的营养环境,不利于放线菌孢子的形成,氮源丰富则有利于菌丝繁殖而不利于孢子形成。一般情况下,干燥和限制营养可直接或间接诱导孢子形成。放线菌斜面的培养温度大多数为28 ℃,少数为37 ℃,培养时间为5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制备
霉菌的孢子培养,一般以大米、小米、玉米、麸皮、麦粒等天然农产品为培养基。这是由于这些农产品中的营养成分较适合霉菌的孢子繁殖,而且这类培养基的表面积较大,可获得大量的孢子。霉菌的培养一般为25~28 ℃,培养时间为4~14天。
⒉ 种子制备
⑴ 摇瓶种子制备
摇瓶种子进罐,常采用母瓶、子瓶两级培养,有时母瓶种子也可以直接进罐。种子培养基要求比较丰富和*,并易被菌体分解利用,氮源丰富有利于菌丝生长。原则上各种营养成分不宜过浓,子瓶培养基浓度比母瓶略高,更接近种子罐的培养基配方。
⑵ 种子罐种子制备
种子罐种子制备的工艺过程,因菌种不同而异,一般可分为一级种子、二级种子和三级种子的制备。孢子(或摇瓶菌丝)被接入到体积较小的种子罐中,经培养后形成大量的菌丝,这样的种子称为一级种子,把一级种子转入发酵罐内发酵,称为二级发酵。如果将一级种子接入体积较大的种子罐内,经过培养形成更多的菌丝,这样制备的种子称为二级种子,将二级种子转入发酵罐内发酵,称为三级发酵。同样道理,使用三级种子的发酵,称为四级发酵。
Eupenicillium│parvum 中文名称:微细正青霉Eupenicillium│parvum分离基物:土壤提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:yes培养方法培养基:CM0072生长条件:25℃存储条件:真空冷冻干燥法 纯度:98%
Talaromyces│ruber 中文名称:红色篮状菌Talaromyces│ruber分离基物:植物块根提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:yes应用领域:分类学研究。培养方法培养基:CM0077生长条件:25℃存储条件:-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:98%
Eupenicillium│ochrosalmoneum 中文名称:赭鲑色正青霉Eupenicillium│ochrosalmoneum分离基物:玉米提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:yes培养方法培养基:CM0072生长条件:25℃存储条件:真空冷冻干燥法 纯度:98%
Salmonella│enrica subsp. enrica 中文名称:肠沙门氏菌肠亚种Salmonella│enrica subsp. enrica提供形式:冻干物安全等级:2模式菌株:no应用领域:研究、质量控制培养方法培养基:CM0002生长条件:36℃存储条件:真空冷冻干燥法 纯度:98%
Morganella morganii 中文名称:摩氏摩根氏菌Morganella morganii提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no应用领域:研究、质量控制培养方法培养基:营养肉汁琼脂:蛋白胨 5.0g,牛肉浸取物 3.0g,NaCl 5.0g,琼脂 15.0g,蒸馏 1.0L,pH7.0。[注] 培养芽孢杆菌时加入5mg MnSO4·H2O,则有利于产生芽孢。生长条件:37℃,好氧,24h。存储条件:真空冷冻干燥法 纯度:98%
Salmonella│enrica subsp. enrica serotype Wandsworth 中文名称:肠沙门氏菌肠亚种旺兹沃思血清型Salmonella│enrica subsp. enrica serotype Wandsworth提供形式:冻干物安全等级:2模式菌株:no应用领域:研究、质量控制培养方法培养基:CM0002生长条件:36℃存储条件:真空冷冻干燥法 纯度:99%
Tuberibacillus│calidus 中文名称:热生肿块芽孢杆菌Tuberibacillus│calidus分离基物:堆肥提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:yes培养方法培养基:CM0998生长条件:50℃存储条件:-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:99%
Bifidobacrium│bifidum 中文名称:两歧双歧杆菌Bifidobacrium│bifidum分离基物:成年人肠道提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no应用领域:用于益生菌类食品。培养方法培养基:CM0791生长条件:37℃存储条件:-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:97%
青春双歧杆菌规格叶测定培养基人肺成纤维细胞肝内胆管上皮细胞ShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin)-(Arg22) 海葵神经素(35肽)
泛测定培养基人支气管平滑肌细胞胃黏膜上皮ShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin)-(Dap22) 海葵神经素(35肽)
游离测定培养基人气管平滑肌细胞肾实质细胞ShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin)-(Gln9) 海葵神经素(35肽)
肌测定培养基人支气管成纤维细胞肾系膜细胞ShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin)-(Gln11) 海葵神经素(35肽)
多价蛋白胨酵母膏(PY)培养基人骨骼肌细胞膀胱上皮细胞rHBcAg 重组乙肝病核心抗原
营养肉汤(不含糖)人骨骼肌卫星细胞膀胱平滑肌细胞rHBeAg(Hepatitis B Virus E Antigen protein) 重组乙肝病e抗原
亮绿乳糖培养基(BGL)人骨骼肌成肌细胞肾动脉内皮细胞rDen(rh-Dengue Virus) 多价重组人登革热病诊断抗原
肠道菌增菌肉汤(EE)人肾上腺皮质细胞肾动脉平滑肌细胞rDen-2(rh-Dengue Virus) 重组人登革热病2型诊断抗原