产品特点:
1、 使用方便:不需昂贵设备。
2、 可以处理各种细菌菌体,包括新鲜菌液和冰冻菌体。
3、 将蛋白提取的时间缩短至30分钟-1小时。
4、 采用温和的中性裂解组分,保持蛋白活性。
5、 含蛋白稳定剂,提取的蛋白稳定。
6、 紫外检测蛋白浓度时,背景干扰低。
7、 蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含6种独立的蛋白酶抑制剂;每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性,包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本试剂盒中不有EDTA,与金属螯和层析等兼容。
细胞名称 胚肺成纤维细胞;IMR-90
形态特性: 成纤维细胞
生长特性: 贴壁生长
特征特性: W.W.Nichols及其同事从一位16周女婴的肺中取材,建立了人二倍体成纤维细胞株IMR-90。分裂潜能,病毒感受性和其它性质都得到了充分研究,因而这株细胞可以作为WI-38或其它标准人肺细胞株的替代株。有报道称这株细胞在表现出衰老前可倍增58次。
培养条件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)优质胎牛血清,10%
传代方法: 消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
传代情况: P(11+5)
冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测: 阴性
产品名称 | 胚肺成纤维细胞;IMR-90 |
生长特性 | 贴壁生长 |
货号 | EY-X63904 |
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分产品现货,超低比价,产品名称货期短,价格优,售后齐全。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
操作流程:
1.1主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生的细胞,以0.25%消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ,计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生的细胞用消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。
培养操作步骤 :
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片*浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
下调膜联蛋白 A2检测试剂盒细胞名称: Cas9稳定
L-谷氨酰叔丁酯盐酸盐Phospho-ALK (Tyr1278) Antibody氟吡啶盐酸盐
L--5-叔丁酯-1-甲酯盐酸盐TGF-β Antibody2,二溴嘧啶
N-苄基盐酸盐IRP2 (D6E6W) Rabbit mAb2,二苄
苄酯盐酸盐Phospho-ALK (Tyr1282/1283) Antibody甲氧基肼盐酸
L-异酯对磺酸盐Pro-TGF-alpha Antibody1-Boc-甲氨基哌啶
L-异叔丁酯盐酸盐HIF-1α Antibody六氟
L-赖氨酸酯Phospho-LSD1 (Ser131) Antibody氨基-2-三氟甲 酸
L-赖氨酸甲酯盐酸盐GNB3 Antibody5-氟-2-硝基三氟甲
L-蛋氨酸甲酯盐酸盐Pin1 Antibody5-羟基香草
胆固硫酸酯钠盐MST3 Antibody1,9-壬二
O-叔丁基-L-甲酯盐酸盐HA-Tag (C29F4) Rabbit mAb-3,5-二硝基三氟甲
L-甲酯盐酸盐HA-Tag (C29F4) Rabbit mAb甲氧基酸酯
L-缬氨酰盐酸盐CD44 (E7K2Y) XP® Rabbit mAb基-2-氟吡啶
1,丁二双盐酸盐CD44 (E7K2Y) XP® Rabbit mAb氟-2-甲酸
半胱盐酸盐Neuropilin-1 (D62C6) Rabbit mAb2-硝基-氟酚
甘氨酰盐酸盐Phospho-Ezrin (Thr567)/Radixin (Thr564)/Moesin (Thr558) (48G2) Rabbit mAb邻氟甲酸甲酯
L-羟甲酯盐酸盐Phospho-Ezrin (Thr567)/Radixin (Thr564)/Moesin (Thr558) (48G2) Rabbit mAb香草酸甲酯
D-甲酯盐酸盐TNF-R2 Antibody3,二羟基甲酸酯
L-甲酯盐酸盐TNF-R2 Antibody2-氟-甲氧基甲酸
D-氨酸酯盐酸盐Sox2 (C70B1) Rabbit mAb (IHC Preferred)()-羟基哌啶
利格列汀;利拉利汀OSR1 Antibody1-(2-)哌
L--α-苄酯Caspr2 Antibody1-苄基-氧杂-哌啶甲酸酯
L-酯盐酸盐GP130 Antibody1-甲酰基-甲基哌
L-氨酸苄酯对甲磺酸盐Phospho-MLKL (Ser345) (D6E3G) Rabbit mAb2-(三氟甲基)苄溴
L-氨酰盐酸盐NPRL2 (D8K3X) Rabbit mAb哌啶-甲酰
L-盐酸盐NF-κB2 p100/p52 (D7A9K) Rabbit mAb四溴噻吩
L-高盐酸盐MCM7 (D10A11) XP® Rabbit mAb对溴苄
氨基酸甲酯盐酸盐MCM7 (D10A11) XP® Rabbit mAb1,1-环烷二甲
TPCK(进分)TNF-R1 (C25C1) Rabbit mAb-甲酸
TPCKTNF-R1 (C25C1) Rabbit mAb-2-氨基吡啶
D-缬氨酰-L-亮氨酰-L-赖氨酸-对-PHF8 (E9R4F) Rabbit mAb2-氨基-间二甲酸
谷二肽,L--谷二肽,力肽SUZ12 (D39F6) XP® Rabbit mAb溴喹啉
L-甲酯SUZ12 (D39F6) XP® Rabbit mAbN-Boc-溴
D-氨酰盐酸盐Beclin-1 Antibody2--硝
硝酸芬替康唑; 硝酸芬康唑Myc-Tag (9B11) Mouse mAb (PE Conjuga)2-氨基-异邻二甲酸
1-苄基D-SDF1 Antibody叔丁基化
胞;231-Cas9-549形态特性: 上皮样Solute Carrier Family 27 Member 4
胚肺成纤维细胞;IMR-90柚皮素480-41-1英文名:Naringenin
英文别名:4'',5,7-Trihydroxyflavanone,naringetol
CAS登录号:480-41-1
分子式:C15H12O5
分子量:272.25
分子结构:
外观:白色针状结晶
规格:20 mg/支
纯度:≥ 98%
用途:用于含量测定/鉴定/药理实验等。
提取来源:漆树科植物梗树(Amacardi-um occidentale L.)果实的核壳等
溶解性:溶于乙醇、和,几乎不溶于水。
熔点:247~250℃
药理药效:具有抗菌、抗炎、抗癌、解痉和利胆作用,临床应用于治疗细菌感染,镇静、抗癌类。
贮存条件: 4℃冷藏、密封、避光
有效期: 2年