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产品展示   ProductsATCC细胞>>转化细胞>>胚胎干细胞;HES3.1
 
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产品名称:
胚胎干细胞;HES3.1
产品型号:
产品报价:
1360
产品特点:
胚胎干细胞;HES3.1相关产品:山羊促生长激素释放激素(GHRH)elisa酶联免疫试剂盒价格
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  胚胎干细胞;HES3.1的详细资料:

实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法; 
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造,并经过铬酸洗液处理; 
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻; 
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率; 
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
公司细胞广泛用于国内院校的细胞生物学研究,作为实验项目研究。下列产品详细介绍:

产品名称

生长特性

货号

胚胎干细胞;HES3.1

贴壁生长

EY-X63703


细胞名称  胚胎干细胞;HES3.1
形态特性: 上皮细胞样

生长特性: 贴壁生长

特征特性: 该细胞属保藏,其特征特性尚未公开。

培养条件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

传代方法: 1:3传代,3-4天传1次

传代情况: C5

冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS

支原体检测: 阴性
冷冻保存细胞之方法
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的  完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。
Koumine

CAS No.:1358-76-5

中文名:钩吻素子

分子式:C20H22N2O

芦荟苷 订购|咨询  高铁血红蛋白还原酶(MHBR) 规格: 20mg

D()奎宁 订购|咨询  高铁血红蛋白还原酶(MHBR) 规格: 20mg

甘松对照药材 订购|咨询  高铁血红蛋白还原酶(MHBR) 规格: 1g

薏苡仁对照药材 订购|咨询  高密度脂蛋白(HDL) 规格: 1g

野漆树苷 订购|咨询  高密度脂蛋白(HDL) 规格: 20mg

白当归素 订购|咨询  高密度脂蛋白(HDL) 规格: 10mg

吴茱萸 订购|咨询  痉挛性截瘫蛋白11(SPG11) 规格: 10mg

黄连 订购|咨询  痉挛蛋白(SPAST) 规格: 20mg

拟人参皂苷RT5P 订购|咨询  脊柱后侧凸肽酶(KY) 规格: 20mg

白头翁皂苷A3 订购|咨询  脊椎蛋白1(SPON1) 规格: 20mg

紫花前胡苷 订购|咨询  脊椎蛋白1(SPON1) 规格: 20mg

吴茱萸次 订购|咨询  脊椎蛋白2(SPON2) 规格: 20mg

三尖杉宁 订购|咨询  脊髓灰质炎病受体(PVR) 规格: 30mg

淡豆豉 订购|咨询  脊髓灰质炎病受体相关分子1(PVRL1) 规格: 15g

细菌内素 订购|咨询  脊髓灰质炎病受体相关分子4(PVRL4) 规格: 10000EU/支

槐花 订购|咨询  凋亡抑制因子5(API5) 规格: 1g

三胞苷二 订购|咨询  凋亡相关因子(FAS) 规格: 30mg/瓶

角鲨 订购|咨询  凋亡相关因子(FAS) 规格: 0.5ml/支

γCatenin  γ连环素/连接蛋白γ抗体    现货供应 0.2ml TetrahydroLBiopterin free base

Thrap3/TRAP150  甲状腺激素受体相关蛋白3抗体    现货供应 0.2ml Tirofiban HCl

PRMT5  组蛋白精甲基转移酶5抗体    现货供应 0.2ml Tirofiban HCl

ELL2  聚合酶延伸因子2抗体    现货供应 0.2ml Pullulan

Escherichka coli K88K99/ETECK88  猪源产肠素性大肠杆菌K88K99抗体    现货供应 0.2ml Vitamin E,dlαtocopherol

CSTF2T/CstF64  细胞分裂相关蛋白CSTF64抗体    现货供应 0.2ml Stavudine

OGlAc transferase  O位N葡萄糖OGT抗体    现货供应 0.2ml Stavudine

SAP62  剪接体相关蛋白62抗体    现货供应 0.2ml Moclobemide

脱氢抗坏血  进口、国产  英文名称:Dehydroascorbicacid  含量:CP,98.5%

脱碳秋水仙  进口、国产  英文名称:Demecolcine  含量:超纯,98%

脱瓜萎镰菌  进口、国产  英文名称:Deoxynivalenol  含量:BR,90%

脱核糖核苷′三  进口、国产  英文名称:dNTPs  含量:高纯,97%

脱核糖核缓冲液  进口、国产  英文名称:DNABuffer  含量:高纯,98%

脱腺苷单二  进口、国产  英文名称:dAMP,2Na  含量:高纯,98%

脱腺苷单  进口、国产  英文名称:dAMP  含量:超纯,98%

脱腺苷三三  进口、国产  英文名称:dATP,3Na  含量:BR,98%

脱叶灵  进口、国产  英文名称:TDZ  含量:高纯,99%

妥布  进口、国产  英文名称:Tobramycin  含量:BR,3000u/mg
人胚胎干细胞;HES3.1山梨醇麦康凯琼脂添加剂规格:1ml/支*5用途:每200ml HB0121培养基中添加1支(含头孢克肟0.01mg和亚碲钾0.5mg) 配10盒

RS培养基规格:100g用途:用于致病性嗜水气单胞菌的选择性分离培养(GB标准)

BCYE-Cys琼脂基础规格:可溶性焦磷铁用途:0.025g每支含量

0.6%酵母浸膏的胰酪胨大豆琼脂(TSA-YE)颗粒规格:250g用途:用于单增李氏菌的分纯,培养,可用于做7%羊血琼脂

蔗糖胰蛋白胨肉汤规格:250g用途:用于致病性嗜水气单胞菌酶联免疫试验

刃天青规格:1g用途:微生物指示剂

产品相关关键字: 胚胎干细胞 HES3.1
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