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产品名称:
胚胎肺成纤维细胞;WI-38
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4-甲氧基二苯胺(
  胚胎肺成纤维细胞;WI-38的详细资料:

公司细胞广泛用于国内院校的细胞生物学研究,作为实验项目研究。下列产品详细介绍:

产品名称

生长特性

货号

胚胎肺成纤维细胞;WI-38

贴壁生长

EY-X63905

细胞名称  胚胎肺成纤维细胞;WI-38
形态特性: 成纤维细胞

生长特性: 贴壁生长

特征特性: WI-38系来自妊娠3个月的正常胚胎肺组织。该细胞系是首株用于人类疫苗制备的系。培液中添加TNFalpha可以促进细胞生长。

培养条件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)优质胎牛血清,10%

传代方法: 消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。

传代情况: P(15+5)

冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS

支原体检测: 阴性

冷冻保存细胞之方法
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法; 
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理; 
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻; 
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率; 
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
叉头框蛋白N3检测试剂盒细胞名称: Cas9稳

硝基-L-氨酸MST4 Antibody4,二甲基环己酮,98%
N-酰-DL-氨酸Phospho-APP (Thr668) Antibody6-
N-酰-DL-AMPA Receptor 4 (GluA 4) (Ala60) Antibody羟基金刚烷
DL-α-氨基己二酸,2-氨基己二酸AMPA Receptor 4 (GluA 4) (Arg860) Antibody5-甲基-羟基吡啶
DL-半盐酸盐,一水TORC2/CRTC2 Antibody2-氨基-5-溴-6-甲基吡啶
DL-盐酸盐Phospho-PKM2 (Tyr105) Antibody2,5-噻吩二羧酸
DL-Forskolin溴-甲酸
DL-FAAH1 (C84F1) Rabbit mAb6-溴正己
DL-盐酸盐GPNMB (E4D7P) XP® Rabbit mAb溴-甲
DL-高氨酸Phospho-PLD1 (Thr147) Antibody2-氨基-甲氧基甲酸
DL-高PLD1 Antibody2,二氢-1H-喹啉-酮
克里唑啼尼盐酸;克里唑替尼盐酸eIF6 (D16E9) XP® Rabbit mAb2-炔噻吩
DL-赖氨酸盐酸盐eIF6 (D16E9) XP® Rabbit mAb炔基溴化镁
DL-正Phospho-PLD1 (Ser561) Antibody溴-1,1,1-三氟酮
DL-正GABA(B)R1 Antibody三(溴)
DL-焦EAAT2 Antibody4,6-二-5-硝基嘧啶
DL-叔GABA(B)R2 AntibodyN-甲基高哌
N-酰-DL-SNF2H (D4W6N) Rabbit mAbBROMO-2-METHOXYBENZALDEHYDE
DL-高半DFCP1 (E9Q1S) Rabbit mAbN-氨基吗啉
间氟-DL-Phospho-LIMK1 (Thr508)/LIMK2 (Thr505) Antibody溴代环烷
钙蛋白酶抑制剂I(进口)Phospho-LIMK1 (Thr508)/LIMK2 (Thr505) Antibody氧羰基酸
DL-氨酰-DL-氨酸Phospho-LIMK1 (Thr508)/LIMK2 (Thr505) Antibody氟-5-溴酚
DL-氨酰-DL-正LIMK1 Antibody2-丁炔酸酯
D-溴氨酸NKCC2 Antibody5-羟基
L-2,二氨基丁酸盐Phospho-AP2M1 (Thr156) Antibody喹啉甲
(1-萘基)-L-氨酸Smad4 (D3M6U) Rabbit mAb2-甲基吡啶
Fmoc-(2-萘基)-D-氨酸Smad4 (D3M6U) Rabbit mAb2,6-二氟甲
D-(2-吡啶基)-氨酸LIMK2 (8C11) Rabbit mAb(氨基基)啉-酮
(吡啶基)-L-氨酸LIMK2 (8C11) Rabbit mAb(R)-1-N-BOC-哌甲酸甲酯
(吡啶基)-D-氨酸Senescence Associad Secretory Phenotype (SASP) Antibody Sampler Kit2-基
FMOC-D-(吡啶基)-氨酸S5a/PSMD4 Antibody2-氨基-6-甲酸
L-瓜氨酸E2-25K/Hip2 Antibody2,二甲氧基苄
Fmoc-L-瓜氨酸UBE2L3 Antibody苄氧基甲
Boc-L-β-高氨酸CD3 (17A2) Rat mAb (violetFluor™ 450 Conjuga)氨基苄
Boc-L-beta-5-苄酯MMP-9 Antibody呋喃甲
Fmoc-L-β-5-叔丁基酯COX IV (D6I4K) Rabbit mAb (Rodent Specific)2-并咪唑

癌细胞;HCT116-Cas9-568形态特性: 上皮样;多角RTN4B
胚胎肺成纤维细胞;WI-38知母皂苷BII136656-07-0中文别名:知母皂苷B2  

英文名:Timosaponin BII  

CAS登录号:136656-07-0

分子式:C45H76O19

分子量:920.50

分子结构:

规格:20mg/支

纯度:≥ 98%

用途:用于含量测定/鉴定/药理实验等。

提取来源:单子叶植物百合科 Liliaceae 知母 Anemarrhena asphodeloides Bge. 的干燥根茎

药理药效:具有增强学习记忆,改善脑功能,防治痴呆的药理作用。

贮存条件: 4℃冷藏、密封、避光

有效期: 2年
操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除细胞消化液。加入含血清的  *细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除细胞消化液后,加入含血清的*培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。

 

产品相关关键字: 胚胎肺成纤维细胞 WI-38
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