细胞名称 肝癌细胞；PLC/PRF/5
形态特性: 上皮细胞样
生长特性: 贴壁生长
特征特性: 该细胞系分泌乙肝病毒表面抗原（HBsAg）。此细胞系原先被支原体污染，后用BM-cycline去除支原体。
培养条件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)优质胎牛血清，10%
传代方法: 消化5-10分钟。1:2。3-4天长满。
传代情况: P80
冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测: 培养法（-）
产品名称 | 肝癌细胞；PLC/PRF/5 |
生长特性 | 贴壁生长 |
货号 | EY-X63474 |
产品特点:
1、 使用方便:不需昂贵设备。
2、 可以处理各种细菌菌体，包括新鲜菌液和冰冻菌体。
3、 将蛋白提取的时间缩短至30分钟-1小时。
4、 采用温和的中性裂解组分，保持蛋白活性。
5、 含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。
6、 紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。
7、 蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含6种独立的蛋白酶抑制剂；每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性，包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本试剂盒中不有EDTA，与金属螯和层析等兼容。
培养操作步骤 ：
1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片*浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
实验要点及说明：
1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
操作流程：
1.1主要试剂与仪器：倒置相差显微镜（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存：
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液（37℃预热，8～10倍体积）离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内，在37℃、5％co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek－293细胞48h换液1次，细胞长至60%～70%融合时，用0.25%消化1～2min，将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散，为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次，获得细胞悬液，然后加入倍量的培养基，温和混匀，吸管分装混合液，传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞，待细胞变圆、脱壁并浮起，加入少量培养基离心，再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液，用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数，按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液＝(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生的细胞，以0.25％消化成单细胞悬液，计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中，每两小时随机取出3瓶细胞，吸除培养基及未贴壁细胞，加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞，取其平均值，按照公式：贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ，计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生的细胞用消化制成单细胞悬液，以1×104/孔接种于24孔板，每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔，计数每孔细胞的数目并计算平均值。
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rmPlexin C1, CF细胞名称: 小鼠骨髓瘤细胞；Sp2/0-Ag14 MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS
rmPlexin A1, CF (50 UG)细胞名称: 猪肾传代细胞；IBRS－2 MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS
rmPlexin A1, CF细胞名称: 小鼠肿瘤细胞
L-色氨 YAP (D8H1X) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjuga)2-氟酮
Fmoc-缬氨 CrkL (D4G7G) Rabbit mAb-2-氟甲酸
D-缬氨 Phospho-PLCγ2 (Tyr1217) Antibody氨基-2-氟甲酸
L-甘氨 Phospho-PLCγ2 (Tyr1217) Antibody2-溴-氟甲
BOC-L-脯氨 CD133 (A8N6N) Mouse mAb (Flow Specific) (Alexa Fluor® 488 Conjuga)2--4,6-二甲基嘧啶
氨基缩二甲 PLCγ2 Antibody2--2-基酮
丝氨,2-氨基-1, PLCγ2 AntibodyN-苄氧羰基-D-天冬酰
N-甲基-D-天α-Tubulin (DM1A) Mouse mAb酰氧基*基化铵
APMSF(进分)α-Tubulin (DM1A) Mouse mAb6,11-二氢二并[b,e]氧杂卓-11-酮
(1R,2S)-1-氨基-2-茚 Phospho-PLCγ2 (Tyr759) Antibody2-溴-5-氟甲
N-BOC-D-色氨Phospho-PLCγ2 (Tyr759) Antibody邻三氟甲氧基
DL-甘氨 Aurora Antibody Sampler Kit氟甲酸酯
2-氨基吡啶-甲 JARID1A (D28B10) Rabbit mAb2,二氟甲酸
-L- JARID1A (D28B10) Rabbit mAb2,二氟
双甘氨二肽CD28 (D2Z4E) Rabbit mAb2-溴-氟甲
Phospho-Vimentin (Ser56) AntibodyBOC-L-5甲酯
人胰岛素Phospho-Vimentin (Ser56) Antibody溴-氟甲
特力利汀;替格列汀Phospho-Vimentin (Ser83) Antibody2,二氟甲
硝酸舍他康唑Phospho-Vimentin (Ser83) Antibody2--5-氟
草津，草净津Snail (C15D3) Rabbit mAb3,二羟
醋酸依降钙素 Snail (C15D3) Rabbit mAb甲酯
醋酸恩夫韦地 Phospho-FRA1 (Ser265) Antibody氟-甲酸
D-海藻糖无水Phospho-Gab2 (Tyr452) Antibody哌啶酸盐
二醋酸(LH-RH)Phospho-Gab2 (Tyr452) (C33G1) Rabbit mAb*基-1,二
醋酸戈舍瑞林 Phospho-Gab2 (Tyr452) (C33G1) Rabbit mAb溴-三氟甲
醋酸亮瑞林 Phospho-Gab2 (Ser159) Antibody2-溴-5-三氟甲
醋酸组氨瑞林 ERCC1 Antibody三氟甲
VGlycogen Synthase (15B1) Rabbit mAb1,8-二溴辛烷
2'-脱氧NuMA Antibody对氟甲砜
盐酸尼非卡兰MAGE-A3 (E9S4X) Rabbit mAb3'-氟酮
盐酸尼非卡兰(标准品)HS1 (D83A8) XP® Rabbit mAb ( Specific)间氟甲酸
辛卡利特 ARC (D7Q3G) Rabbit mAb吡啶硫
α1 Phospho-Glycogen Synthase (Ser641) Antibody氟甲酸甲酯
奥比沙星(标准品)HS1 (D5A9) XP® Rabbit mAb (Rodent Specific)2-氟-甲
奥比沙星 Phospho-PKC (pan) (gamma Thr514) (D6Y3D) Rabbit mAb4,4,5,5,6,6-七氟-1-(2-噻吩基)-1,己二酮
醋酸β4 Glycogen Synthase Antibody对氟甲酸
H-214.5g/LiterGlucose)10%FBS
rmPDGF Rb/Fc, CF (100 UG)细胞名称: 小鼠结缔组织L细胞株929克隆；L-929[L929] DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS
肝癌细胞；PLC/PRF/5人高速泳动蛋白17(HMG-17)ELISA试剂盒MIP-1αELISAkit产品规格:48T/96T。
人低分子量细胞角蛋白(CK-LMW)ELISA试剂盒MIP-1αELISAKit产品规格:48T/96T。
人多肽YY(Peptide-YY)ELISA试剂盒MIP-1αELISAkit产品规格:48T/96T。
人多药耐药相关蛋白(MRP)ELISA试剂盒MIP-1βELISAkit产品规格:48T/96T。
人肺耐药蛋白(LRP)ELISA试剂盒MIP-1βELISAkit产品规格:48T/96T。
人副甲状旁腺激素相关肽(PTHrp)ELISA试剂盒MIP-1βELISAkit产品规格:48T/96T。
人甘丙肽/甘丙素(GAL)ELISA试剂盒MIP-2ELISAkit产品规格:48T/96T。
人高分子量细胞角蛋白(CK-HMW)ELISA试剂盒MIP-2ELISAkit产品规格:48T/96T。
