本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA),专用于定量检测大鼠血清、血浆、组织匀浆及细胞上清液中的酸性成纤维细胞生长因子(aFGF/FGF-1)蛋白浓度。检测范围覆盖 0.313-20 ng/mL,灵敏度达 0.16 ng/mL,适用于血管生成、组织修复、细胞增殖及肿瘤研究等领域。
产品名称:大鼠酸性成纤维细胞生长因子elisa试剂盒
英文名称:aFGF/FGF-1 ELISA Kit
产品规格:48T/96T
产品货号:CS-5485E
核心原理:

大鼠酸性成纤维细胞生长因子 (aFGF/FGF-1) elisa 试剂盒的原理是双抗体夹心法,通过固相载体捕获抗原,再用酶标记的检测抗体进行识别,最后通过底物显色反应来定量检测。
固相化:微孔板预先包被抗大鼠 aFGF/FGF-1 抗体。
结合:加入标准品或样本,aFGF/FGF-1 被固相抗体捕获。
检测:加入生物su化的抗大鼠 aFGF/FGF-1 抗体和 HRP 标记的亲和素,形成 "抗体 - 抗原 - 酶标抗体" 复合物。
显色:加入 TMB 底物,被 HRP 催化后由蓝色变为黄色。
测定:用酶标仪在 450nm 波长测定吸光度 (OD 值),浓度与 OD 值成正比。
样本要求:

1. 样本类型与处理
血清:使用无热原/内毒素试管采集,避免溶血或脂血。1000×g离心10分钟分离血清,-20℃保存,避免反复冻融。
血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝,离心后取上清。
细胞上清:1000×g离心10分钟去除颗粒,-70℃保存。
组织匀浆:生理盐水匀浆后离心取上清,-20℃保存。
2. 注意事项
样本中禁止添加NaN3,以免抑制HRP活性。
细胞培养上清可能因细胞状态等因素导致检测波动,建议设复孔。
操作步骤:

试剂准备将试剂盒平衡至室温(20-25℃),浓缩洗涤液按 1:20 稀释备用。标准品按说明书进行梯度稀释,配制系列浓度标准曲线溶液。
实验流程加样:设置空白孔、标准孔、待测样品孔,空白孔仅加稀释液,其余孔分别加入标准品或待测样品,37℃孵育。加酶标抗体:除空白孔外,每孔加入酶标抗体,轻轻混匀,37℃避光孵育。洗涤:弃去孔内液体,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后甩干,重复洗涤 4-5 次,最后拍干残留液体。显色:每孔加入 TMB 显色液,37℃避光孵育,孔内呈现蓝色。终止:每孔加入终止液,混匀后颜色由蓝色转为黄色。检测:在 450nm 波长下测定各孔 OD 值,15 分钟内完成读数。
关键提示实验全程严格控温,孵育时使用封板膜避免蒸发。洗涤需充分,否则易造成高背景、结果偏差。显色液需避光,终止顺序与加样顺序保持一致,确保充分混匀。
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