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产品展示   ProductsATCC细胞>>转化细胞>>胚肺二倍体细胞;KMB-17
 
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产品名称:
胚肺二倍体细胞;KMB-17
产品型号:
产品报价:
1360
产品特点:
胚肺二倍体细胞;KMB-17相关产品:
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  胚肺二倍体细胞;KMB-17的详细资料:

细胞名称  胚肺二倍体细胞;KMB-17
形态特性: 成纤维细胞样

生长特性: 贴壁生长

特征特性: 来自于4周龄女孩胚胎,1975年中国医学科学院昆明医学生物学研究所建立;可作为转染宿主,用于肺损伤或分化的研究。

培养条件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)新生牛血清,10%;水解乳蛋白,10%

传代方法: 1:2-1:4

传代情况: P10

冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS

支原体检测: 培养法(-)
公司细胞广泛用于国内院校的细胞生物学研究,作为实验项目研究。下列产品详细介绍:

产品名称

生长特性

货号

胚肺二倍体细胞;KMB-17

贴壁生长

EY-X63452


冷冻保存细胞之方法
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法; 
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造,并经过铬酸洗液处理; 
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻; 
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率; 
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量 生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的  完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。
rrCXCL3/CINC-2b, CF (25 UG)细胞名称: 猫肾细胞;CRFK MEM-

酚红Jak2 (D2E12) XP® Rabbit mAb (Biotinylad)甲基三丁基化铵
环贝特CD44 (156-3C11) Mouse mAb (Biotinylad)2-溴酰溴
曙红Y(水溶)TCL1 Antibody2-溴吡
偶氮胭脂红BBAP31 Antibody2-二环己基-2,4,6-三异基联
偶氮胭脂红GHEF1/NEDD9 (2G9) Mouse mAb2-二-叔丁膦基-2',4',6'-三异基联
荧光桃红B,酸性红92GCN2 (E9H6C) Rabbit mAbBoc-L-beta-高脯氨酸
依莱铬红BWWOX Antibody奎尼丁
固红RLWWOX Antibody基磺酰
固红紫色LB盐hnRNP A0 Antibody2-溴代异戊酸
苋菜红ACSL1 Antibody(S)-(-)-2-甘氨
丽春红4R,新胭脂红,亮丽春红5R,酸性红18M-Cadherin (D4B9L) Rabbit mAb5-氨基-2-溴嘧啶
酚藏花红M-Cadherin (D4B9L) Rabbit mAb2-苄基酸
天狼星玫红,BBTHEX1 Antibody对甲氧基基酚
钌红Tris-Glycine SDS Running Buffer (10X) 5-氨基-2-氟甲酸
藻红B,四荧光素Phospho-Akt (Ser473) (587F11) Mouse mAb没有中文名
酸性红88 Phospho-Akt (Ser473) (587F11) Mouse mAb氟-2-
酸性红183THEX1 (D2B4) Rabbit mAb(S)-羟基丁酸酯
酸性红9PKM2 (D78A4) XP® Rabbit mAbL-谷氨酰
孔雀石绿PKM2 (D78A4) XP® Rabbit mAbL-赖氨酸
灿烂绿,亮绿Phospho-Drosophila Akt (Ser505) Antibody6-甲氧基-2,3,4,5-四氢吡啶
甲基绿THEX1 (D66A11) Rabbit mAb2,二-5-甲基吡啶
茜素绿;酸性绿25Phospho-Akt (Thr308) (244F9) Rabbit mAb(R)-缩水甘油
萘酚绿BPhospho-Akt (Thr308) (244F9) Rabbit mAb氧甲酰基亚基三基膦
固绿FCFPhospho-Akt (Ser473) (193H12) Rabbit mAb甲酸
子种绿A;蓝APhospho-Akt (Ser473) (193H12) Rabbit mAb2-甲氧基基酸
亮绿SF(淡黄)Phospho-Akt (Ser473) (193H12) Rabbit mAb甲氧基酸
健那绿BAkt3 Antibody2,3,4,6-四酰氧基-alpha-D-吡喃葡萄糖溴化物
酸性绿3CNOT3 (D4K4N) Rabbit mAb1-叔丁氧羰基哌
酸性绿 50 Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb-2-吡啶甲酸
酸性绿APhospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb2-溴蒽醌
吲哚菁绿Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAbN-BOC-GAMMA-氨基丁酸
靛蓝N-Cadherin Antibody9-溴菲
甲基蓝CD6 (E9Y7Y) Rabbit mAb戊钠
伊文思蓝;埃文斯蓝MST3b Antibody2-氨基--6-甲氧基嘧啶
曲利蓝LSD1 (1B2E5) Mouse mAb5--2-氟
维多利亚蓝B,性蓝 26CXXC1 (D1R5R) Rabbit mAb2-溴-5-氟

胚肺二倍体细胞;KMB-175核苷酶(5-NT)ELISA试剂盒LHELISAKit产品规格:48T/96T。

人烟酰胺腺嘌呤二核苷磷(NADPH)ELISA试剂盒LHELISAKit产品规格:48T/96T。

L丙氨解氨酶(PAL)ELISA试剂盒LHRHELISAKit产品规格:48T/96T。

N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA试剂盒LHRHELISAKit产品规格:48T/96T。

α2抗纤溶酶(α2-AP)ELISA试剂盒LHRHELISAKit产品规格:48T/96T。

α2纤溶酶抑制物(α2-PI)ELISA试剂盒LIFELISAkit产品规格:48T/96T。

αL艾杜糖苷酶(IDUA)ELISA试剂盒LIFELISAKit产品规格:48T/96T。

αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG)ELISA试剂盒LIFELISAkit产品规格:48T/96T。

产品相关关键字: 胚肺二倍体细胞 KMB-17
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