产品简介:

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA),专用于定量检测大鼠血清、血浆、脑组织匀浆、神经组织提取物及细胞上清液中的神经营养因子 4(NT-4)蛋白浓度。检测范围覆盖对应梯度区间,灵敏度达对应检出限值,适用于神经发育、神经元存活、神经损伤修复及退行性神经系统疾病等研究领域。
产品名称:大鼠神经营养因子4(NT-4)elisa试剂盒
英文名称:NT-4 ELISA Kit
产品规格:48T/96T
产品货号:CS-5515E
检测原理:

大鼠神经营养因子 4 (NT-4) ELISA 试剂盒的原理是双抗体夹心法,通过固相载体捕获抗原,再用酶标记的检测抗体进行识别,最后通过底物显色反应来定量检测。
固相化:微孔板预先包被抗大鼠 NT-4 抗体。
结合:加入标准品或样本,NT-4 被固相抗体捕获。
检测:加入生物su化的抗大鼠 NT-4 抗体和 HRP 标记的亲和素,形成 "抗体 - 抗原 - 酶标抗体" 复合物。
显色:加入 TMB 底物,被 HRP 催化后由蓝色变为黄色。
测定:用酶标仪在 450nm 波长测定吸光度 (OD 值),浓度与 OD 值成正比。
实验步骤:

试剂准备:将试剂盒平衡至室温(20-25℃),洗涤缓冲液按1:19稀释。标准品梯度稀释至所需浓度。
加样:每孔加入100μL标准品或样本,37℃孵育90分钟。
洗涤:弃去液体,每孔加满洗涤液,静置30秒后甩干,重复5次。
加检测抗体:每孔加入100μL检测抗体-HRP,37℃孵育60分钟。
洗涤:同步骤3。
显色:每孔加入90μL TMB底物A+B混合液,37℃避光孵育15分钟。
终止:每孔加入50μL终止液,立即摇匀(颜色由蓝变黄)。
检测:450nm波长测定吸光度(OD值),15分钟内完成。
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操作步骤:

1.试剂平衡试剂盒室温平衡 30 min;浓缩洗涤液按说明书稀释混匀。
2.设孔加样设空白、标准品、待测样品孔,精准加样,封板。
3.温育结合37℃孵育 30–60 min,弃液拍干。
4.洗板加满洗涤液浸泡,甩干拍干,重复3–5 次。
5.加酶结合物除空白孔外每孔加 HRP 标记液,封板 37℃孵育。
6.再次洗板充分洗净未结合游离酶,控干残留液体。
7.显色避光加显色液 A/B,避光 37℃显色 10–15 min。
8.终止读数加终止液变色稳定后,立刻酶标仪读 OD 值。
9.结果计算标准曲线拟合,换算样本浓度。