本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA),专用于定量检测大鼠血清、血浆、组织匀浆及细胞上清液中的糖原磷酸化酶(GP)浓度。检测范围覆盖 0.313-20 ng/mL,灵敏度达 0.16 ng/mL,适用于糖原分解代谢、能量供应、组织缺血损伤及糖代谢紊乱研究等领域。
产品名称 |
大鼠糖原磷酸化酶(GP)elisa试剂盒 | 英文名称 | GP ELISA Kit |
货号 | CS-5463E | 规格 | 48T/96T |
保存 | 避光保存 | 用途 | 仅供科研实验 |
核心原理:

固相化:微孔板预先包被抗大鼠 GP 抗体。
结合:加入标准品或样本,GP 被固相抗体捕获。
检测:加入化的抗大鼠 GP 抗体和 HRP 标记的亲和素,形成 "抗体 - 抗原 - 酶标抗体" 复合物。
显色:加入 TMB 底物,被 HRP 催化由蓝色变为黄色。
测定:用酶标仪在 450nm 波长测定吸光度 (OD 值),浓度与 OD 值成正比。
样本要求:

1. 样本类型与处理
血清:无热源无菌采血管采集,杜绝溶血、脂血污染;1000×g 离心 10 min 分离上清,-20℃分装保存,严禁反复冻融。血浆:选用 EDTA / 柠檬酸盐 / 肝素抗凝管采血混匀,离心去除血细胞取上清备用(部分试剂盒慎用肝素)。细胞上清:收集后 1000×g 离心 10 min 去除细胞碎片与杂质,-70~-80℃低温保存。组织匀浆:预冷生理盐水 / PBS 冰上制备匀浆,高速离心取澄清上清,-20℃避光分装贮存。
2. 通用注意事项
1) 样本严禁添加叠氮钠(NaN₃),会抑制 HRP 酶活性,导致显色失效。
2) 所有样本避免室温久置,全程低温操作,防止蛋白降解。
3) 溶血、浑浊、微生物污染样本直接废弃,干扰抗体抗原结合。
4) 细胞上清、低丰度指标样本务必设置复孔,校正实验误差。
5) 检测浓度超标时,仅用试剂盒配套稀释液稀释,匹配基质体系。
操作步骤:

试剂准备将试剂盒平衡至室温(20-25℃),浓缩洗涤液按 1:20 稀释备用。标准品按说明书进行梯度稀释,配制系列浓度标准曲线溶液。
实验流程加样:设置空白孔、标准孔、待测样品孔,空白孔仅加稀释液,其余孔分别加入标准品或待测样品,37℃孵育。加酶标抗体:除空白孔外,每孔加入酶标抗体,轻轻混匀,37℃避光孵育。洗涤:弃去孔内液体,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后甩干,重复洗涤 4-5 次,最后拍干残留液体。显色:每孔加入 TMB 显色液,37℃避光孵育,孔内呈现蓝色。终止:每孔加入终止液,混匀后颜色由蓝色转为黄色。检测:在 450nm 波长下测定各孔 OD 值,15 分钟内完成读数。
关键提示实验全程严格控温,孵育时使用封板膜避免蒸发。洗涤需充分,否则易造成高背景、结果偏差。显色液需避光,终止顺序与加样顺序保持一致,确保充分混匀。
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