产品简介:
本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA),专用于定量检测大鼠软骨、椎间盘、玻璃体及关节组织匀浆中的 Col Ⅱ 浓度。检测范围覆盖 0.313-20 ng/mL,灵敏度达 0.16 ng/mL,适用于软骨发育、骨关节炎、软骨修复及细胞外基质代谢研究。
产品名称:大鼠Ⅱ型胶原(Col Ⅱ)elisa试剂盒
英文名称:Col Ⅱ ELISA Kit
产品规格:48T/96T
货号:CS-6269E
检测原理:
大鼠Ⅱ型胶原 (Col Ⅱ) elisa试剂盒的原理是双抗体夹心法,通过固相载体捕获抗原,再用酶标记的检测抗体进行识别,最后通过底物显色反应来定量检测。
固相化:微孔板预先包被抗大鼠 Col Ⅱ 抗体。
结合:加入标准品或样本,Col Ⅱ 被固相抗体捕获。
检测:加入化的抗大鼠 Col Ⅱ 抗体和 HRP 标记亲和素,形成抗体 - 抗原 - 酶标抗体复合物。
显色:加入 TMB 底物,被 HRP 催化由蓝色变为黄色。
测定:用酶标仪在 450nm 波长测定吸光度 (OD 值),浓度与 OD 值成正比。
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实验步骤:
1.平衡试剂:试剂盒室温平衡 30 min,浓缩洗涤液按比例稀释备用。
2.加样:设空白孔、标准品孔、样品孔,每孔加对应标准品 / 稀释后样本,封板温育。
3.温育反应:37℃孵育 30–60 min,完成抗原抗体结合。
4.洗板:弃液甩干,洗涤液注满每孔,浸泡后拍干,重复洗板3–5 次。
5.加酶结合物:除空白孔外,每孔加入 HRP 标记抗体,封板 37℃再次温育。
6.再次洗板:同上述洗板流程,洗净未结合游离酶标物。
7.显色:每孔先后加入 A、B 显色液,避光 37℃显色 10–15 min。
8.终止读数:加终止液终止反应,颜色由蓝变黄;立即用酶标仪在对应波长测定 OD 值。
9.结果计算:以标准品浓度、OD 值绘制标准曲线,换算样本待测指标浓度。