产品简介：
本试剂盒采用比浊法酶联免疫吸附法（ELISA），专用于定量检测大鼠血清中的补体溶血活性（AH50）。检测范围覆盖 0.313-20 CH50U/mL，灵敏度达 0.16 CH50U/mL，适用于补体系统整体功能、免疫缺陷病、感染性疾病及自身免疫病研究等领域。
产品名称：(AH50)elisa试剂盒
英文名称：AH50 ELISA Kit
产品规格：48T/96T
产品货号：CS-6043E
检测原理：
大鼠补体溶血活性 (AH50) ELISA 试剂盒的原理是比浊法，通过补体介导的红细胞溶血反应，利用吸光度变化来定量检测补体的整体溶血活性。
固相化：微孔板预先包被绵羊红细胞悬液与抗体的复合物。
结合：加入标准品或样本，补体与复合物结合并激活补体溶菌通路。
检测：红细胞发生溶血，释放血红蛋白，使反应液出现浊度变化。
显色：无需额外底物，直接通过血红蛋白的吸光度变化反映溶血程度。
测定：用酶标仪在 450nm 波长测定吸光度 (OD 值)，活性与 OD 值成正比。
实验步骤：
1. 试剂回温至 20–25℃，稀释洗涤液、梯度配制标准品。
2. 每孔加 100μL 标准 / 样本，37℃孵育 90min，洗板 5 次。
3. 加 HRP 抗体，37℃孵育 60min，再次洗板 5 次。
4. 加 TMB 避光显色 15min，加终止液混匀。
5. 450nm 快速测 OD 值，拟合曲线算浓度。
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操作步骤：
1、试剂与样本准备：
将试剂盒平衡至室温（20-25℃），按说明书稀释洗涤缓冲液（通常1:19）。
标准品：用梯度稀释至0.313、0.625、1.25、2.5、5、10、20 ng/mL系列浓度。
样本：血清、血浆或组织匀浆上清。若t-PA浓度高，可按说明书（如1:10）稀释。
2、加样与孵育：
每孔加入100μL标准品或样本。
轻轻振荡混匀，避免触碰孔壁。
37℃孵育90分钟（部分试剂盒可能为120分钟，需以说明书为准）。
3、洗涤：
弃去孔内液体，用洗涤缓冲液加满每孔，静置30秒后甩干，重复5-6次。
4、加检测抗体与孵育：
每孔加入100μL化抗猪t-PA检测抗体。
37℃孵育60分钟。
5、再次洗涤：
同步骤3，洗去未结合抗体。
6、显色：
每孔加入90-100μL TMB底物混合液（A液+B液）。
37℃避光孵育10-15分钟。
7、终止与测定：
每孔加入50μL终止液，立即混匀（颜色由蓝变黄）。
在加终止液后15分钟内，用酶标仪在450nm波长处测定各孔吸光度（OD值）。
