产品简介：

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA），专用于定量检测大鼠血清、血浆、组织匀浆及细胞上清液中的表皮生长因子（EGF）蛋白浓度。检测范围覆盖 0.313-20 ng/mL，灵敏度达 0.16 ng/mL，适用于细胞增殖分化、表皮修复、肿瘤发生及创伤愈合研究等领域。

产品名称：大鼠表皮生长因子(EGF)elisa试剂盒

英文名称：EGF ELISA Kit

产品规格：48T/96T

产品货号：CS-6052E

检测原理：

大鼠表皮生长因子 (EGF) ELISA 试剂盒的原理是‌双抗体夹心法‌，通过固相载体捕获抗原，再用酶标记的检测抗体进行识别，最后通过底物显色反应来定量检测。

‌固相化‌：微孔板预先包被抗大鼠 EGF 抗体。

‌结合‌：加入标准品或样本，EGF 被固相抗体捕获。

‌检测‌：加入生物su化的抗大鼠 EGF 抗体和 HRP 标记的亲和素，形成 "抗体 - 抗原 - 酶标抗体" 复合物。

‌显色‌：加入 TMB 底物，被 HRP 催化后由蓝色变为黄色。

‌测定‌：用酶标仪在 450nm 波长测定吸光度 (OD 值)，浓度与 OD 值成正比。

实验步骤‌：

‌试剂准备‌：将试剂盒平衡至室温(20-25℃)，洗涤缓冲液按1:19稀释。标准品梯度稀释至所需浓度。

‌加样‌：每孔加入100μL标准品或样本，37℃孵育90分钟。

‌洗涤‌：弃去液体，每孔加满洗涤液，静置30秒后甩干，重复5次。

‌加检测抗体‌：每孔加入100μL检测抗体-HRP，37℃孵育60分钟。

‌洗涤‌：同步骤3。

‌显色‌：每孔加入90μL TMB底物A+B混合液，37℃避光孵育15分钟。

‌终止‌：每孔加入50μL终止液，立即摇匀（颜色由蓝变黄）。

‌检测‌：450nm波长测定吸光度(OD值)，15分钟内完成。

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操作步骤‌：

1.试剂提前室温平衡 30 min，浓缩洗涤液按说明书稀释配制。

2.设置空白孔、标准品孔、待测样品孔，精准加样后封板。

3.37℃恒温孵育结合反应，结束后弃孔内液体拍干。

4.加满洗涤液浸泡清洗，重复洗板 3–5 次，去除未结合杂质。

5.除空白孔外，每孔加入 HRP 酶结合物，再次 37℃温育。

6.重复洗板流程洗净游离酶标抗体，保证背景干净。

7.依次加入显色液避光显色，待梯度蓝色清晰显现。

8.加入终止液终止反应，颜色由蓝转黄，即刻用酶标仪读取 OD 值。

9.根据标准曲线拟合计算，得出样本目标物质浓度。