本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA），专用于定量检测大鼠血清、血浆、组织匀浆中的 DPPⅣ 浓度。检测范围覆盖 0.313-20 ng/mL，灵敏度达 0.16 ng/mL，适用于肠促胰素降解、糖代谢调控、糖尿病及 DPP-4 抑制剂药效评价研究。

核心原理：

固相化：微孔板预先包被抗大鼠 DPPⅣ 抗体。

结合：加入标准品或样本，DPPⅣ 被固相抗体捕获。

检测：加入化的抗大鼠 DPPⅣ 抗体和 HRP 标记亲和素，形成抗体 - 抗原 - 酶标抗体复合物。

显色：加入 TMB 底物，被 HRP 催化由蓝色变为黄色。

测定：用酶标仪在 450nm 波长测定吸光度 (OD 值)，浓度与 OD 值成正比。

样本要求：

1. 血清：避免溶血脂血，离心分离，-20℃分装，禁反复冻融。

2. 血浆：EDTA / 柠檬酸盐抗凝，慎用肝素，离心取上清。

3. 细胞上清：离心除杂质，-80℃保存。

4. 组织匀浆：冰上匀浆、高速离心取上清低温储存。

5. 禁忌：勿加叠氮钠抑制 HRP；拒收污染溶血样本，建议复孔检测。

操作步骤：

1. 试剂回温至 20–25℃，稀释洗涤液、梯度配制标准品。

2. 每孔加 100μL 标准 / 样本，37℃孵育 90min，洗板 5 次。

3. 加 HRP 抗体，37℃孵育 60min，再次洗板 5 次。

4. 加 TMB 避光显色 15min，加终止液混匀。

5. 450nm 快速测 OD 值，拟合曲线算浓度。

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