公司细胞广泛用于国内院校的细胞生物学研究,作为实验项目研究。下列产品详细介绍:
产品名称 | 生长特性 | 货号 |
中国仓鼠卵巢细胞系;pDSra2-mpl-X | 贴壁生长 | EY-X63691 |
细胞名称 中国仓鼠卵巢细胞系;pDSra2-mpl-X
形态特性: 上皮细胞样
生长特性: 贴壁生长
特征特性: 该细胞属保藏,其特征特性尚未公开。
培养条件: DMEM/F12(1:1):Ham'sF12/DMEMedium(DMEH-16/F-1250%Mixturew/oHEPES,withNEAAMedium)10%FBS
传代方法: 1:3传代,3-4天传1次
传代情况: C6
冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测: 阴性
冷冻保存细胞之方法
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
N1-Methoxymethyl picrinine
CAS No.:1158845-78-3
中文名:
分子式:C22H26N2O4
核黄素 订购|咨询 (TRY) 规格: 100mg
桂皮 订购|咨询 X3(TRYX3) 规格: 2g
环 订购|咨询 原激活肽(TAP) 规格: 100mg
奥平 订购|咨询 原激活肽(TAP) 规格: 100mg
头孢S异构体 订购|咨询 原激活肽(TAP) 规格: 50mg
水防风 订购|咨询 胰腺再生蛋白Ⅳ(REG4) 规格: 1g
结石草 订购|咨询 胰腺再生蛋白Ⅳ(REG4) 规格: 2g
羊奶奶叶 订购|咨询 胰腺再生蛋白Ⅳ(REG4) 规格: 5.0g
力克拉敏 订购|咨询 胰腺再生蛋白Iα(REG1α) 规格: 50mg
订购|咨询 胰腺再生蛋白Iα(REG1α) 规格: 100mg
白果 订购|咨询 胰腺型脂酶A2(pPLA2) 规格: 1g
千金子甾(千金子素L1) 订购|咨询 胰腺特异转录因子1α(PTF1α) 规格: 20mg
间基 订购|咨询 胱天蛋白酶1(CASP1) 规格: 50mg
醋 订购|咨询 胱天蛋白酶1(CASP1) 规格: 15mg/支
聚铵酯II 订购|咨询 胱天蛋白酶1(CASP1) 规格: 200mg
枇杷叶 订购|咨询 胱天蛋白酶10(CASP10) 规格: 1g
订购|咨询 胱天蛋白酶11(CASP11) 规格: 25mg
大豆油 订购|咨询 胱天蛋白酶11(CASP11) 规格: 50mg
FMRP/FMR1 脆性X智力低下蛋白抗体 现货供应 0.2ml Sudan II /Solvent Orange 7
IFRD1 干扰素相关发育调节蛋白1抗体(神经生长因子诱导蛋白PC4) 现货供应 0.2ml Sudan3
PERP/p53 apoptosis effector related to PMP22 p53凋亡相关作用蛋白PMP22抗体 现货供应 0.1ml Sudan IV/Solvent Red 24
phosphoGATA4(ser 262) GATA结合蛋白4抗体 现货供应 0.1ml Oil red O/Solvent Red 27
GPR109A/Puma gamma G蛋白偶联受体109A抗体 现货供应 0.2ml Sudan red G/Solvent Red 1
S3B 电压门控通道S3B蛋白抗体 现货供应 0.2ml Sudan Black B /Solvent Black 3
TIS11D/ERF2 表皮生长因子反应蛋白2抗体 现货供应 0.2ml Sudan Red B/Solvent Red 25
xCT/CCBR1 钙离子通道阻端耐药蛋白CCBR1抗体 现货供应 0.2ml Sudan Red 7B/Solvent Red 19
四酐 进口、国产 英文名称:TCPA 含量:CP,99.5%
四四荧光素二 进口、国产 英文名称:RoseBengalNasalt 含量:超纯,99%
四羟甲基 进口、国产 英文名称:Pentaerythritol 含量:AR,97%
四羟S 进口、国产 英文名称:ThioflavineS 含量:BR,470/570NM
四氢麸 进口、国产 英文名称:THFA 含量:AR,96%
四氢精 进口、国产 英文名称:Sperminetetrahydrochloride 含量:BR,98%
四氢硼钾 进口、国产 英文名称:Potassiumborohydride 含量:AR,97%
四水铬二 进口、国产 英文名称:Sodiumchromatetetrahydrate 含量:GR,99.5%
四水合金 进口、国产 英文名称:Chloroauricacidhydrated 含量:基准试剂,99.95%
四水合钼铵 进口、国产 英文名称:Ammoniummolybdatetetrahydrate 含量:BR,98%
中国仓鼠卵巢细胞系;pDSra2-mpl-X改良EC(MEC+n)肉汤规格:新生霉素用途:4.5mg每支含量
O/F培养基(HLGB)规格:250g用途:用于鉴别弧菌葡萄糖代谢类型(发酵型或氧化型)(SN标准)
Amies运送培养基(含活性炭)规格:250g用途:用于各种致病性菌检验的标本采取,输送和保存
Cary-Blair氏运送培养基管规格:20支/包用途:用于运送肠道致病菌标本
纸片(30ug/片)规格:10片/瓶用途:用于空肠弯曲菌药敏试验。
SB培养基规格:250g用途:用于基因工程菌大肠杆菌培养,营养非常丰富
操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除细胞消化液。加入含血清的 *细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除细胞消化液后,加入含血清的*培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。