产品简介:
本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA),专用于定量检测大鼠红细胞裂解液、全血及血清中的 2,3-DPG 浓度。检测范围覆盖 0.313-20 ng/mL,灵敏度达 0.16 ng/mL,适用于血红蛋白氧亲和力、缺氧适应、红细胞功能及呼吸循环研究。
产品名称:大鼠2,3-二磷酸甘油酸elisa试剂盒
英文名称:2,3-DPG ELISA Kit
产品规格:48T/96T
货号:CS-6273E
检测原理:
大鼠2,3-二磷酸甘油酸 elisa试剂盒的原理是双抗体夹心法,通过固相载体捕获抗原,再用酶标记的检测抗体进行识别,最后通过底物显色反应来定量检测。
固相化:微孔板预先包被抗大鼠 2,3-DPG 抗体。
结合:加入标准品或样本,2,3-DPG 被固相抗体捕获。
检测:加入化的抗大鼠 2,3-DPG 抗体和 HRP 标记亲和素,形成抗体 - 抗原 - 酶标抗体复合物。
显色:加入 TMB 底物,被 HRP 催化由蓝色变为黄色。
测定:用酶标仪在 450nm 波长测定吸光度 (OD 值),浓度与 OD 值成正比。
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实验步骤:
1.试剂提前室温平衡 30 min,浓缩洗涤液按说明书稀释配制。
2.设置空白孔、标准品孔、待测样品孔,精准加样后封板。
3.37℃恒温孵育结合反应,结束后弃孔内液体拍干。
4.加满洗涤液浸泡清洗,重复洗板 3–5 次,去除未结合杂质。
5.除空白孔外,每孔加入 HRP 酶结合物,再次 37℃温育。
6.重复洗板流程洗净游离酶标抗体,保证背景干净。
7.依次加入显色液避光显色,待梯度蓝色清晰显现。
8.加入终止液终止反应,颜色由蓝转黄,即刻用酶标仪读取 OD 值。
9.根据标准曲线拟合计算,得出样本目标物质浓度。