公司细胞广泛用于国内院校的细胞生物学研究，作为实验项目研究。下列产品详细介绍：
产品名称 | 生长特性 | 货号 |
肺癌细胞；TKB-1 | 贴壁生长 | EY-X63467 |
细胞名称 肺癌细胞；TKB-1
形态特性: 上皮样
生长特性: 贴壁生长
特征特性:
培养条件:
传代方法:
传代情况: P13
冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测: 培养法（-）
冷冻保存细胞之方法
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
实验要点及说明：
1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将*成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% *和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
rmSpinesin, CF (10 UG)
三酚Phospho-STING (Ser366) (D8K6H) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjuga)
1-萘酚PIAS3 Antibody硝基二酸二酯
邻酚TRAF5 (D3E2R) Rabbit mAbDL-高半*硫内酯盐酸盐
对酚Pim-3 (D17C9) Rabbit mAb(S)-缩水甘油
对二酚Pim-3 (D17C9) Rabbit mAb1,2,3,4,6-beta-D-葡萄糖五酸酯
愈创木酚p38 MAPK (D13E1) XP® Rabbit mAb (PE Conjuga)*
萘酚ASEAAT1 Antibody2,6-二硝
α-萘酚醌烷GGA3 Antibody2,6-二硝基
2-（5-溴-2-吡啶偶氮）-5-（二氨基）酚Phospho-TrkA (Tyr785)/TrkB (Tyr816) (C67C8) Rabbit mAbbeta-烟酰腺嘌呤二核苷二钠
蒽酮(AR)Phospho-TrkA (Tyr785)/TrkB (Tyr816) (C67C8) Rabbit mAb2--氟
硫代米氏酮TFIIB (2F6A3H4) Mouse mAb2-基酰酸酯
茚三酮，一水CHD2 Antibody5-甲氧基色
菲尼酮Phospho-MKK7 (Ser271/Thr275) Antibody溴-1--2-氟
单酸阿糖腺苷;阿糖腺苷单酸PD-L1 (Extracellular Domain Specific) (D8T4X) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjuga)3,二氟硫酚
α-萘黄酮MKK7 Antibody2,6-二羟
紫脲酸铵FXR1 Antibody2,二
1-萘TPA (12-O-tradecanoylphorbol-1Aceta)2,6-二溴酚
对二Phospho-p38 MAPK (Thr180/Tyr182) (3D7) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjuga)1-甲基-1,2,三唑
联Phospho-β-Canin (Ser675) (D2F1) XP® Rabbit mAbL-(+)-二甲酯
对Phospho-β-Canin (Ser675) (D2F1) XP® Rabbit mAb甲基二酸二酯
邻联甲RYBP (D8J7W) Rabbit mAb2-溴代异戊酸酯
盐酸羟AMPKβ1 (71C10) Rabbit mAb甲酸正己酯
3,3'-二甲基联萘AMPKβ1 (71C10) Rabbit mAb盐酸奎宁
N-基-2-萘α-Synuclein (D37A6) XP® Rabbit mAb2,二磺酰
金Oα-Synuclein (D37A6) XP® Rabbit mAb2-硝基
2,二巯基磺酸钠Atg12 (D88H11) Rabbit mAb间三酚
硫酸铈铵Atg12 (D88H11) Rabbit mAb硝基邻二甲酸
盐酸邻联甲NAC1 Antibody (Rodent Preferred)2,5-二溴甲酸
偏钒酸铵Phospho-AMPKα1 (Ser485) Antibody-2-氟甲基酯
1-萘盐酸盐Phospho-AMPKα1 (Ser485)/AMPKα2 (Ser491) Antibody2,3,三氟甲酸
邻二Phospho-AMPKβ1 (Ser182) Antibody盐酸*
6-异硫酸荧光素AMPKγ1 Antibody2,5-二羟基对二甲酸
2,二AMPKγ1 Antibody2-甲酸甲酯
硫代酰Phospho-AMPKα (Thr172) (D79.5E) Rabbit mAb2'-羟基酮
磺基罗丹明101Phospho-AMPKα (Thr172) (D79.5E) Rabbit mAb2,二溴甲酸
N-基-1-萘Acetyl-CoA Carboxylase 1 Antibody邻苄
细胞；NCI-H661 RPMI1640(w/oHepes)优质胎牛血清，10%
肺癌细胞；TKB-1人鸟苷解离抑制因子(GDI)ELISA试剂盒M-CSFELISAkit产品规格:48T/96T。
人羟赖氨(Hyl)ELISA试剂盒M-CSFELISAkit产品规格:48T/96T。
人粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)ELISA试剂盒M-CSFRELISAKit产品规格:48T/96T。
人补体1q(C1q)ELISA试剂盒MCTELISAKit产品规格:48T/96T。
人神经生长导向因子Slit2ELISA试剂盒MCVELISAKit产品规格:48T/96T。
人可溶性肌球蛋白重链1(sMHC-1)ELISA试剂盒MDAELISAKit产品规格:48T/96T。
人*(AP)ELISA试剂盒MDAELISAKit产品规格:48T/96T。
人间隙连接蛋白(Cx)ELISA试剂盒MDAELISAKit产品规格:48T/96T。
操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除*细胞消化液。加入含血清的 *细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用*细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除*细胞消化液后，加入含血清的*培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
