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产品名称:
肺癌细胞;TKB-1
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肺癌细胞;TKB-1相关产品:DL-*302-72-7
CBZ-*1138-80-3
FMOC-L-*29022-11-5
王树脂
  肺癌细胞;TKB-1的详细资料:

公司细胞广泛用于国内院校的细胞生物学研究,作为实验项目研究。下列产品详细介绍:

产品名称

生长特性

货号

肺癌细胞;TKB-1

贴壁生长

EY-X63467

细胞名称  肺癌细胞;TKB-1
形态特性: 上皮样

生长特性: 贴壁生长

特征特性:

培养条件:

传代方法:

传代情况: P13

冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS

支原体检测: 培养法(-)

冷冻保存细胞之方法
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法; 
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造,并经过铬酸洗液处理; 
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻; 
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率; 
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将*成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% *和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
rmSpinesin, CF (10 UG)

三酚Phospho-STING (Ser366) (D8K6H) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjuga)
1-萘酚PIAS3 Antibody硝基二酸二酯
邻酚TRAF5 (D3E2R) Rabbit mAbDL-高半*硫内酯盐酸盐
对酚Pim-3 (D17C9) Rabbit mAb(S)-缩水甘油
对二酚Pim-3 (D17C9) Rabbit mAb1,2,3,4,6-beta-D-葡萄糖五酸酯
愈创木酚p38 MAPK (D13E1) XP® Rabbit mAb (PE Conjuga)*
萘酚ASEAAT1 Antibody2,6-二硝
α-萘酚醌烷GGA3 Antibody2,6-二硝基
2-(5-溴-2-吡啶偶氮)-5-(二氨基)酚Phospho-TrkA (Tyr785)/TrkB (Tyr816) (C67C8) Rabbit mAbbeta-烟酰腺嘌呤二核苷二钠
蒽酮(AR)Phospho-TrkA (Tyr785)/TrkB (Tyr816) (C67C8) Rabbit mAb2--氟
硫代米氏酮TFIIB (2F6A3H4) Mouse mAb2-基酰酸酯
茚三酮,一水CHD2 Antibody5-甲氧基色
菲尼酮Phospho-MKK7 (Ser271/Thr275) Antibody溴-1--2-氟
单酸阿糖腺苷;阿糖腺苷单酸PD-L1 (Extracellular Domain Specific) (D8T4X) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjuga)3,二氟硫酚
α-萘黄酮MKK7 Antibody2,6-二羟
紫脲酸铵FXR1 Antibody2,二
1-萘TPA (12-O-tradecanoylphorbol-1Aceta)2,6-二溴酚
对二Phospho-p38 MAPK (Thr180/Tyr182) (3D7) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjuga)1-甲基-1,2,三唑
联Phospho-β-Canin (Ser675) (D2F1) XP® Rabbit mAbL-(+)-二甲酯
对Phospho-β-Canin (Ser675) (D2F1) XP® Rabbit mAb甲基二酸二酯
邻联甲RYBP (D8J7W) Rabbit mAb2-溴代异戊酸酯
盐酸羟AMPKβ1 (71C10) Rabbit mAb甲酸正己酯
3,3'-二甲基联萘AMPKβ1 (71C10) Rabbit mAb盐酸奎宁
N-基-2-萘α-Synuclein (D37A6) XP® Rabbit mAb2,二磺酰
金Oα-Synuclein (D37A6) XP® Rabbit mAb2-硝基
2,二巯基磺酸钠Atg12 (D88H11) Rabbit mAb间三酚
硫酸铈铵Atg12 (D88H11) Rabbit mAb硝基邻二甲酸
盐酸邻联甲NAC1 Antibody (Rodent Preferred)2,5-二溴甲酸
偏钒酸铵Phospho-AMPKα1 (Ser485) Antibody-2-氟甲基酯
1-萘盐酸盐Phospho-AMPKα1 (Ser485)/AMPKα2 (Ser491) Antibody2,3,三氟甲酸
邻二Phospho-AMPKβ1 (Ser182) Antibody盐酸*
6-异硫酸荧光素AMPKγ1 Antibody2,5-二羟基对二甲酸
2,二AMPKγ1 Antibody2-甲酸甲酯
硫代酰Phospho-AMPKα (Thr172) (D79.5E) Rabbit mAb2'-羟基酮
磺基罗丹明101Phospho-AMPKα (Thr172) (D79.5E) Rabbit mAb2,二溴甲酸
N-基-1-萘Acetyl-CoA Carboxylase 1 Antibody邻苄

细胞;NCI-H661 RPMI1640(w/oHepes)优质胎牛血清,10%
肺癌细胞;TKB-1人鸟苷解离抑制因子(GDI)ELISA试剂盒M-CSFELISAkit产品规格:48T/96T。

人羟赖氨(Hyl)ELISA试剂盒M-CSFELISAkit产品规格:48T/96T。

人粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)ELISA试剂盒M-CSFRELISAKit产品规格:48T/96T。

人补体1q(C1q)ELISA试剂盒MCTELISAKit产品规格:48T/96T。

人神经生长导向因子Slit2ELISA试剂盒MCVELISAKit产品规格:48T/96T。

人可溶性肌球蛋白重链1(sMHC-1)ELISA试剂盒MDAELISAKit产品规格:48T/96T。

人*(AP)ELISA试剂盒MDAELISAKit产品规格:48T/96T。

人间隙连接蛋白(Cx)ELISA试剂盒MDAELISAKit产品规格:48T/96T。
操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除*细胞消化液。加入含血清的  完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用*细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除*细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。

 

产品相关关键字: 肺癌细胞 TKB-1
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021-69985169
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