产品简介：
本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA），专用于定量检测大鼠血清、血浆及肝纤维化组织匀浆中的 PⅢNP 浓度。检测范围覆盖 0.313-20 ng/mL，灵敏度达 0.16 ng/mL，适用于肝纤维化分期、胶原合成活性、组织纤维化及抗纤维化药物评价研究。
产品名称：大鼠Ⅲ型前胶原氨基末端肽elisa试剂盒
英文名称:PⅢNP ELISA Kit
产品规格：48T/96T
货号:CS-6258E
检测原理：
大鼠Ⅲ型前胶原氨基末端肽(PⅢNP) elisa试剂盒的原理是双抗体夹心法，通过固相载体捕获抗原，再用酶标记的检测抗体进行识别，最后通过底物显色反应来定量检测。
固相化：微孔板预先包被抗大鼠 PⅢNP 抗体。
结合：加入标准品或样本，PⅢNP 被固相抗体捕获。
检测：加入化的抗大鼠 PⅢNP 抗体和 HRP 标记亲和素，形成抗体 - 抗原 - 酶标抗体复合物。
显色：加入 TMB 底物，被 HRP 催化由蓝色变为黄色。
测定：用酶标仪在 450nm 波长测定吸光度 (OD 值)，浓度与 OD 值成正比。
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实验步骤：
1.加样孵育
每孔精准加入 100μL 对应标准品 / 待测样本，空白孔加等量；贴封板膜密封微孔板，置于 37℃恒温孵育箱，避光孵育 90min，保证抗原抗体充分结合。
2.洗板
轻柔弃去孔内液体，吸水纸上快速拍干；每孔加满洗涤工作液，静置浸泡 30s，甩干拍净；重复洗涤5 次，去除未结合杂质，降低背景值。
3.加酶结合物孵育
除空白孔外，每孔加入 100μL HRP 标记特异性检测抗体；轻微水平晃板混匀，重新封板，37℃避光恒温孵育 60min。
4.二次洗板
重复上述洗板操作 5 次，严格拍干孔内残留液体，杜绝残留洗液造成假阳性、数据偏差。
5.底物显色
避光条件下，每孔加入 90μL TMB 底物显色液，轻柔混匀；37℃避光精准孵育 10~15min，此时液体逐步显现蓝色，显色深浅与待测物含量正相关。
6.反应终止
严格遵循加样顺序，每孔快速加入 50μL 酸性终止液，轻晃微孔板充分混匀，蓝色即刻转为黄色，终止酶促显色反应。
7.上机读数检测
加终止液后15min 内，用酶标仪测定各孔 450nm 波长吸光度（OD 值）；以标准品浓度为横坐标、OD 值为纵坐标绘制标准曲线，拟合方程计算待测样本目标蛋白浓度。
