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产品名称 | 非洲绿猴肾细胞;GL-37 |
生长特性 | 贴壁生长 |
货号 | EY-X63468 |
细胞名称 非洲绿猴肾细胞;GL-37
形态特性:
生长特性: 贴壁生长
特征特性:
培养条件:
传代方法:
传代情况:
冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测: 培养法(-)
产品特点:
1、 使用方便:不需昂贵设备。
2、 可以处理各种细菌菌体,包括新鲜菌液和冰冻菌体。
3、 将蛋白提取的时间缩短至30分钟-1小时。
4、 采用温和的中性裂解组分,保持蛋白活性。
5、 含蛋白稳定剂,提取的蛋白稳定。
6、 紫外检测蛋白浓度时,背景干扰低。
7、 蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含6种独立的蛋白酶抑制剂;每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性,包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本试剂盒中不有EDTA,与金属螯和层析等兼容。
培养操作步骤 :
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片*浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
操作流程:
1.1主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生的细胞,以0.25%消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ,计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生的细胞用消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。
rmSlit3, CF (50 UG)细胞名称: 人成骨肉瘤细胞;MG-63 MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)优质热灭活胎牛血清,10%
rmSlit2, CF (50 UG)细胞名称: 人导管癌细胞;ZR-75-1 RPMI1640(w/oHepes)优质胎牛血清,10%
rmSlit1, CF (50 UG)细胞名称: 人甲状腺鳞癌细胞;SW579[SW579;SW-579] L15:LeibovitzMedium优质胎牛血清,10%
rmSLAM, CF (50 UG)细胞名称: 人急性T淋巴细胞白血病细胞;Jurkat,CloneE6-1 RPMI1640(w/oHepes)优质胎牛血清,10%
rmSIGNR7, CF (50 UG)细胞名称: 人骨肉瘤细胞;SW1353 L15:LeibovitzMedium优质胎牛血清,10%
rmSIGNR1/Fc, CF (50 UG)细胞名称: 人癌细胞;Hs578T DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)优质胎牛血清,10%;0.01mg/ml牛胰岛素
rmSiglec-F/Fc, CF (50 UG)细胞名称: 人急性淋巴细胞白血病T淋巴细胞;CCRF-CEM[CCRFCEM] RPMI1640(w/oHepes)优质胎牛血清,10%
rmSiglec-2/CD22/Fc, CF (50 UG)细胞名称: 人胃癌细胞;NCI-N87[N87] RPMI1640(w/oHepes)优质胎牛血清,10%
rmSiglec-1, CF (50 UG)细胞名称: 人急性非B非T淋巴细胞性白血病细胞;Reh RPMI1640(w/oHepes)优质胎牛血清,10%
rmSIGIRR/Fc, CF (100 UG)细胞名称: 人咽鳞癌细胞;FaDu MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)优质胎牛血清,10%
rmShh-N, CF (25 UG)细胞名称: 人结直肠腺癌细胞;HCT-15[HCT15] RPMI1640(w/oHepes)优质胎牛血清,10%
rmShh-N (C25II Substitute), CF (25 UG)细胞名称: 人结直肠腺癌上皮细胞;DLD-1 RPMI1640(w/oHepes)优质胎牛血清,10%
rmShh-N (C25II Substitute) (25 UG)细胞名称: 人癌细胞;MDA-MB-468-06 L15:LeibovitzMedium优质胎牛血清,10%
rmShh-N (25 UG)细胞名称: 人肾透明细胞癌;Caki-1 McCoy's5AMedia(ModifiedwithTricine)优质胎牛血清,10%
rmsFRP-3, CF (10 UG)细胞名称: 人脑星形胶质母细胞瘤;U-87MG[U87MG;U87MG] MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)优质胎牛血清,10%
rmsFRP-3 (10 UG)细胞名称: 人红系白血病细胞;TF-1 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS;8ng/mlrHUGM-csf
非洲绿猴肾细胞;GL-37人踝蛋白(talin)ELISA试剂盒MDCELISAkit产品规格:48T/96T。
人凝胶原蛋白(gelson)ELISA试剂盒MDCELISAkit产品规格:48T/96T。
人抗淋巴细胞球蛋白(ALG)ELISA试剂盒MDCELISAkit产品规格:48T/96T。
人衰变加速因子(DAF/CD55)ELISA试剂盒MECELISAKit产品规格:48T/96T。
人血栓前体蛋白(TpP)ELISA试剂盒MEPEELISAKit产品规格:48T/96T。
人神经肽Y(NP-Y)ELISA试剂盒MethylaseELISAKit产品规格:48T/96T。
人结蛋白(Des)ELISA试剂盒MF/MPFELISAKit产品规格:48T/96T。
人肌球蛋白(Myosin)ELISA试剂盒MGPELISAKit产品规格:48T/96T。