产品简介:

本试剂盒采用间接法酶联免疫吸附法(ELISA),专用于定量检测大鼠血清、血浆中的卵清蛋白特异性 IgG(OVA sIgG)抗体浓度。检测范围覆盖 0.313-20 ng/mL,灵敏度达 0.16 ng/mL,适用于免疫应答检测、过敏性疾病及疫苗研究等领域。
产品名称:大鼠卵清蛋白特异性IgGelisa试剂盒
英文名称:OVA sIgG ELISA Kit
产品规格:48T/96T
产品货号:CS-5647E
检测原理:

大鼠卵清蛋白特异性 IgG (OVA sIgG) ELISA 试剂盒的原理是间接法,通过固相载体包被抗原,捕获样本中特异性抗体,再用酶标记的二抗进行识别,最后通过底物显色反应来定量检测。
固相化:微孔板预先包被卵清蛋白(OVA)抗原。
结合:加入标准品或样本,OVA sIgG 抗体与固相抗原结合。
检测:加入 HRP 标记的抗大鼠 IgG 二抗,与结合在固相载体上的抗体形成复合物。
显色:加入 TMB 底物,被 HRP 催化后由蓝色变为黄色。
测定:用酶标仪在 450nm 波长测定吸光度 (OD 值),浓度与 OD 值成正比。
实验步骤:

1. 试剂回温至 20–25℃,稀释洗涤液、梯度配制标准品。
2. 每孔加 100μL 标准 / 样本,37℃孵育 90min,洗板 5 次。
3. 加 HRP 抗体,37℃孵育 60min,再次洗板 5 次。
4. 加 TMB 避光显色 15min,加终止液混匀。
5. 450nm 快速测 OD 值,拟合曲线算浓度。
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操作步骤:

1、试剂与样本准备:
将试剂盒平衡至室温(20-25℃),按说明书稀释洗涤缓冲液(通常1:19)。
标准品:用梯度稀释至0.313、0.625、1.25、2.5、5、10、20 ng/mL系列浓度。
样本:血清、血浆或组织匀浆上清。若t-PA浓度高,可按说明书(如1:10)稀释。
2、加样与孵育:
每孔加入100μL标准品或样本。
轻轻振荡混匀,避免触碰孔壁。
37℃孵育90分钟(部分试剂盒可能为120分钟,需以说明书为准)。
3、洗涤:
弃去孔内液体,用洗涤缓冲液加满每孔,静置30秒后甩干,重复5-6次。
4、加检测抗体与孵育:
每孔加入100μL化抗猪t-PA检测抗体。
37℃孵育60分钟。
5、再次洗涤:
同步骤3,洗去未结合抗体。
6、显色:
每孔加入90-100μL TMB底物混合液(A液+B液)。
37℃避光孵育10-15分钟。
7、终止与测定:
每孔加入50μL终止液,立即混匀(颜色由蓝变黄)。
在加终止液后15分钟内,用酶标仪在450nm波长处测定各孔吸光度(OD值)。