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产品展示   ProductsATCC细胞>>转化细胞>>293来源病毒包装细胞;ΦA
 
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产品名称:
293来源病毒包装细胞;ΦA
产品型号:
产品报价:
1360
产品特点:
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  293来源病毒包装细胞;ΦA的详细资料:

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产品名称

293来源病毒包装细胞;ΦA

生长特性

贴壁生长

货号

EY-X63449

细胞名称  293来源病毒包装细胞;ΦA
形态特性: 上皮样

生长特性: 贴壁生长

特征特性:

培养条件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS

传代方法: 1:2~1:3传代。

传代情况: C3

冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS

支原体检测: 培养法(-)

产品特点:
1、 使用方便:不需昂贵设备。
2、 可以处理各种细菌菌体,包括新鲜菌液和冰冻菌体。
3、 将蛋白提取的时间缩短至30分钟-1小时。
4、 采用温和的中性裂解组分,保持蛋白活性。
5、 含蛋白稳定剂,提取的蛋白稳定。
6、 紫外检测蛋白浓度时,背景干扰低。
7、 蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含6种独立的蛋白酶抑制剂;每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性,包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本试剂盒中不有EDTA,与金属螯和层析等兼容。 
培养操作步骤
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布; 
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片); 
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时; 
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中; 
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法; 
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造,并经过铬酸洗液处理; 
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻; 
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率; 
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
操作流程:
1.1主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%胰酶消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞,以0.25%胰酶消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ,计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。
rrIGF-I/IGF-1, CF (50 UG)细胞名称: 人胚肺二倍体细胞;2BS MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)新生牛血清,10%;水解乳蛋白,10%

rrIFN-g, CF (100 UG)细胞名称: 人胚肺成纤维细胞;MRC-5 MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)新生牛血清,10%;水解乳蛋白,10%

rrIFN-g (100 UG)细胞名称: 抗人绒毛膜促性腺激素b杂交瘤细胞;H10X RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

rrIFN-b (100000 UN)细胞名称: 抗人绒毛膜促性腺激素杂交瘤细胞;HN4 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

rrIFN-a (100000 UN)细胞名称: 人胚肾细胞;293[HEK-293] DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)新生牛血清,10%

rrICAM-1/CD54/Fc, CF (50 UG)细胞名称: 中国仓鼠卵巢细胞K1(亚系克隆);CHO-K1 DMEM/F12(1:1):Ham'sF12/DMEMedium(DMEH-16/F-1250%Mixturew/oHEPES,withNEAAMedium)新生牛血清,10%

rrgp130/Fc, CF (100 UG)细胞名称: 非洲绿猴肾细胞;VERO-76 DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)新生牛血清,10%

rrGM-CSF, CF (5 UG)细胞名称: 人肺癌细胞;A549[A-549] F12K新生牛血清,10%

rrGM-CSF, CF (25 UG)细胞名称: 人胚肺二倍体细胞;KMB-17 MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)新生牛血清,10%;水解乳蛋白,10%

rrGM-CSF (5 UG)细胞名称: 人细胞;HelaS3[HeLaS3] F12K新生牛血清,10%

rrGM-CSF (25 UG)细胞名称: 小鼠骨髓瘤细胞;Sp2/0-Ag14 DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)新生牛血清,10%

rrGHR/Fc, CF (50 UG)细胞名称: 非洲绿猴肾细胞;VERO MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)新生牛血清,10%

rrGFRa-1/Fc, CF (100 UG)细胞名称: 抗丙型肝炎病核心抗原单克隆抗体杂交瘤细胞株;HCV-C39 RPMI1640(w/oHepes)新生牛血清,10%

rrGFRa-1/Fc (100 UG)细胞名称: 抗乙型肝炎病表面抗原单克隆抗体杂交瘤细胞株;HBS-r6 RPMI1640(w/oHepes)新生牛血清,10%

rrGDNF, CF (50 UG)细胞名称: 抗丙型肝炎病NS3抗原单克隆抗体杂交瘤细胞株;HCVNS3-57 RPMI1640(w/oHepes)新生牛血清,10%

rrGDNF, CF (10 UG)细胞名称: 抗丙型肝炎病NS5抗原单克隆抗体杂交瘤细胞株;NS5 DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)新生牛血清,10%
293来源病毒包装细胞;ΦA人前胶原C端肽酶(PCP)ELISA试剂盒LC1ELISAKit产品规格:48T/96T。

人黑色素瘤相关抗原(MAGE)ELISA试剂盒LCA/CD45ELISAKit产品规格:48T/96T。

人鸟氨脱羧酶(ODC)ELISA试剂盒LCAELISAKit产品规格:48T/96T。

人转移因子(TF)ELISA试剂盒LDLELISAKit产品规格:48T/96T。

人纤维母细胞表面抗原(FSP)ELISA试剂盒LDL-ICELISAKit产品规格:48T/96T。

人胃粘液素(GM)ELISA试剂盒LDLRELISAKit产品规格:48T/96T。

人脱氧核苷尿嘧啶(BrdU)ELISA试剂盒LebtospiraIgGELISAKit产品规格:48T/96T。

人钙离子通道抗体(VGCC)ELISA试剂盒LEPELISAkit产品规格:48T/96T。

产品相关关键字: 293来源病毒包装细胞 ΦA
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