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产品名称:
293来源病毒包装细胞;ΦA-GP
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  293来源病毒包装细胞;ΦA-GP的详细资料:

公司细胞广泛用于国内院校的细胞生物学研究,作为实验项目研究。下列产品详细介绍:

产品名称

生长特性

货号

293来源病毒包装细胞;ΦA-GP

贴壁生长

EY-X63448

细胞名称  293来源病毒包装细胞;ΦA-GP
形态特性: 上皮样

生长特性: 贴壁生长

特征特性:

培养条件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS

传代方法: 1:2~1:3传代。

传代情况: C3

冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS

支原体检测: 培养法(-)

冷冻保存细胞之方法
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法; 
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理; 
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻; 
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率; 
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
rrIL-18, CF (25 UG)细胞名称: 抗人IgM小鼠杂交瘤细胞;3C6 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

rrIL-18 (25 UG)细胞名称: 抗赭曲霉素A杂交瘤细胞;Z01 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

rrIL-17F, CF (25 UG)细胞名称: 抗CEA小鼠杂交瘤;C1 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

rrIL-17F (25 UG)细胞名称: 抗B1小鼠杂交瘤细胞;B01 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

rrIL-13, CF (25 UG)细胞名称: 抗肝细胞生长因子(HGF)杂交瘤细胞;HGF1 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

rrIL-13 (25 UG)细胞名称: 抗肝细胞生长因子(HGF)杂交瘤细胞;HGF2 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

rrIL-12, CF (10 UG)细胞名称: 抗CEA小鼠杂交瘤细胞;C2 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

rrIL-12 (10 UG)细胞名称: 抗抗人垂体泌乳素杂交瘤细胞;PRL2 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

rrIL-10, CF (5 UG)细胞名称: 抗抗人垂体泌乳素杂交瘤细胞;PRL1 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

rrIL-10, CF (25 UG)细胞名称: 抗精核蛋白;HP1 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

rrIL-10 (Cys167Tyr), CF (10 UG)细胞名称: 抗精核蛋白;HP2 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

rrIL-10 (Cys167Tyr) (10 UG)细胞名称: 抗精核蛋白;HP3 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

rrIL-10 (5 UG)细胞名称: 抗小鼠杂交瘤细胞;D7 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

rrIL-10 (25 UG)细胞名称: 抗孕杂交瘤细胞;P01 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

rrIL-1 Rrp2/Fc, CF (100 UG)细胞名称: 抗睾小鼠杂交瘤细胞;T01 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

rrIL-1 RI/Fc, CF (100 UG)细胞名称: 抗α杂交瘤细胞;H80X RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
293来源病毒包装细胞;ΦA-GP人组织蛋白酶D(cath-D)ELISA试剂盒LAC/LAELISAKit产品规格:48T/96T。

人组织多肽特异性抗原(TPS)ELISA试剂盒LAMELISAKit产品规格:48T/96T。

人肾小球组织糖基化终末产物(GTE-AGE)ELISA试剂盒LAPELISAKit产品规格:48T/96T。

人不对称二甲基精氨(ADMA)ELISA试剂盒LATELISAKit产品规格:48T/96T。

人补体片断5b(C5b)ELISA试剂盒LATELISAKit产品规格:48T/96T。

人补体片断4b(C4b)ELISA试剂盒LATSELISAKit产品规格:48T/96T。

人补体片断3b(C3b)ELISA试剂盒LBPELISAKit产品规格:48T/96T。

人多形核白细胞弹性蛋白酶(PMNElastase)ELISA试剂盒LBPELISAKit产品规格:48T/96T。
操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除细胞消化液。加入含血清的  *细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除细胞消化液后,加入含血清的*培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。

 

产品相关关键字: 293来源病毒 包装细胞 ΦA-GP
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