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产品展示   ProductsATCC细胞>>转化细胞>>双位点HC-kit受体细胞株;DMF7
 
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产品名称:
双位点HC-kit受体细胞株;DMF7
产品型号:
产品报价:
1360
产品特点:
公司细胞现货供应,双位点HC-kit受体细胞株;DMF7质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
  双位点HC-kit受体细胞株;DMF7的详细资料:

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产品名称双位点HC-kit受体细胞株;DMF7
生长特性悬浮生长
货号EY-X63211

细胞名称  双位点HC-kit受体细胞株;DMF7
形态特性   圆形 
生长特性  悬浮生长 
特征特性   该细胞株由陈松森教授实验室建立;双位点Cys151和Cys183突变的c-Kit基因转染293ET细胞,筛选获得。 
培养条件   DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS;IL-3 or rhGM-CSF 
传代方法   1:3传代;3~4天1次。
传代情况  不详
冻存条件   基础培养基+8%DMSO+20%FBS 
支原体检测  培养法(-) 
 
产品特点:
1、 使用方便:不需昂贵设备。
2、 可以处理各种细菌菌体,包括新鲜菌液和冰冻菌体。
3、 将蛋白提取的时间缩短至30分钟-1小时。
4、 采用温和的中性裂解组分,保持蛋白活性。
5、 含蛋白稳定剂,提取的蛋白稳定。
6、 紫外检测蛋白浓度时,背景干扰低。
7、 蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含6种独立的蛋白酶抑制剂;每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性,包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本试剂盒中不有EDTA,与金属螯和层析等兼容。 
培养操作步骤 :
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布; 
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片); 
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时; 
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中; 
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法; 
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造,并经过铬酸洗液处理; 
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻; 
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率; 
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
操作流程:
1.1主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%胰酶消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞,以0.25%胰酶消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ,计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。
连续计数10d,绘制细胞生长曲线
人IPO-38蛋白(IPO38)elisa试剂盒  Human IPO-38 Elisa Kit 96T/48T
人切除修复交叉互补基因1(ERCC1)elisa试剂盒 human excision repair cross-complementation group 1, ERCC1 Elisa Kit 96T/48T
人羰基化蛋白(PC)elisa试剂盒 Human Protein Carbonyl, PC Elisa Kit  96T/48T
人磷酸化核因子κB抑制蛋白α(pIKBα)elisa试剂盒 human phospho-inhibitory subunit of NF-κBα, pIKBα Elisa Kit  96T/48T
人桩蛋白(Pax)elisa试剂盒 Human paxillin, Pax Elisa Kit 96T/48T
人小乳腺表皮粘蛋白(SBEM)elisa试剂盒 Human small breast epithelial mucin, SBEM Elisa Kit 96T/48T
人类似60S核糖体蛋白L21(LOC382344)elisa试剂盒 human Mus musculus similar to 60S ribosomal protein L12, LOC382344 Elisa Kit  96T/48T
人类粘蛋白2(ORM2)elisa试剂盒 human orosomucoid 2, ORM2 Elisa Kit 96T/48T
人MAX二聚化蛋白1(mxd1)elisa试剂盒 human MAX dimerization protein 1, mxd1 Elisa Kit 96T/48T
人水闸蛋白14(CLDN14)elisa试剂盒 human claudin 14, CLDN14 Elisa Kit 96T/48T
人可溶性半乳糖苷结合凝集素3(Lgals3)elisa试剂盒 human lectin-galactose binding-soluble 3, Lgals3 Elisa Kit 96T/48T
人主要穹窿蛋白(MVP)elisa试剂盒 human major vault protein, MVP Elisa Kit 96T/48T
人泛素蛋白D(UBD)elisa试剂盒 human ubiquitin D, UBD Elisa Kit 96T/48T
人toll样受体2(TLR2)elisa试剂盒 human toll-like receptor 2, TLR2 Elisa Kit 96T/48T
人青少年2型血色素沉着症/幼年型血色病相关蛋白2(HFE2)elisa试剂盒  human hemochromatosis type 2/uvenile-uman homolog, HFE2 LISA Kit 96T/48T
人卷曲蛋白8(FZD8)elisa试剂盒 human frizzled homolog 8, FZD8 Elisa Kit 96T/48T
人蜗牛同源物2(SNAI2)elisa试剂盒 human snail homolog 2, SNAI2 Elisa Kit 96T/48T
人高尔基蛋白73(GP-73)elisa试剂盒 Human golgi protein 73, GP-73 Elisa Kit 96T/48T
人TU3A蛋白(TU3A)elisa试剂盒 Human TU3A Protein Elisa Kit 96T/48T
人电子转移黄素蛋白β肽(ETFB)elisa试剂盒 Human electron-transfer-flavoprotein beta polypeptide, ETFB Elisa Kit 96T/48T
人皮肤蛋白(DPT)elisa试剂盒 Human dermato-pontin, DPT Elisa Kit 96T/48T
人可溶性蛋白185(sp185/HER-2)elisa试剂盒 Human soluble protein 185, sp185/HER-2 Elisa Kit 96T/48T

Anti-Bassoon/RCN  锌指蛋白231抗体  0.2ml
Anti-Bax   Bax抗体  0.1ml
Anti-Bcl-2   Bcl-2抗体  0.1ml
Anti-BCRP/ABCG2/BXP-21   乳腺癌耐药相关蛋白抗体  0.1ml
Anti-BDNF    脑源神经营养因子/脑衍化神经营养因子  0.1ml
Anti-Beta-casein   β-酪蛋白兔抗山羊、绵羊  0.2ml
anti-bov β-lactoglobulin   牛β-乳球蛋白抗体  1.0ml
anti-bov Casein   抗牛酪蛋白抗体  1.0ml
Anti-BFGF/FGF-2   碱性成纤维细胞生长因子抗体  0.1ml
Anti-BGP   骨保护蛋白/骨钙素抗体  0.1ml
Anti-Bid    BH3结构域凋亡诱导蛋白抗体  0.1ml
Anti-BIRC5/Survivin variant   细胞凋亡抑制因子5抗体  0.1ml
Anti-BK channel    BK通道蛋白抗体  0.1ml
Anti-BKCa channels   钙激活钾通道蛋白抗体  0.1ml
Anti-BMP2    骨形态发生蛋白-2抗体  0.1ml
Anti-BMP-7   骨形态发生蛋白-7抗体  0.2ml
Anti-BNP    脑钠素/利钠肽抗体  0.1ml
Anti-BNP/Biotin    生物素化脑钠肽  0.5ml
Anti-BRAF   黑素瘤相关蛋白抗体  0.2ml
Anti-BRCA1   乳腺癌易感基因1抗体  0.2ml
Anti-BRCA2   乳腺癌易感基因2抗体  0.2ml
Anti-BrdU    溴脱氧尿苷抗体  0.1ml
Anti-BRMS-1    乳腺癌转移抑制基因1抗体  0.1ml
Anti-RCA   兔抗牛血清白蛋白抗体  0.1ml
双位点HC-kit受体细胞株;DMF7Anti-BTG2/TIS21   B细胞迁移基因2抗体  0.1ml
Anti-BTK   鼠抗人非受体型酪氨酸激酶BTK单克隆抗体  0.1ml
Anti-C5a   过敏毒素C5a抗体  0.2ml

产品相关关键字: 双位点HC-kit 受体细胞株 DMF7
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