人-细胞素elisa检测试剂盒组成及试剂配制
人-细胞素elisa检测试剂盒组成及试剂配制
用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗该指标抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生wu素化的抗该指标抗体、HRP标记的亲和素,经过*洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的该指标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制
1、酶联板:一块(96孔;48孔)
2、标准品:2瓶
3、样品稀释液:1×20ml/瓶
4、生wu素标记抗体稀释液:1×10ml/瓶
5、辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液:1×10ml/瓶
6、生wu素标记抗体:1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根过氧化物酶标记亲和素:1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液:1×10ml/瓶
9、浓洗涤液:1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10、终止液:1×10ml/瓶
实验材料与试剂配制
1、仪器与材料:酶标仪(使用前预热30分钟),微量加液器、吸头、蒸馏水或去离子水,滤纸。
2、洗液的配制:按比例配制洗液备用。