大鼠直肠上皮细胞操作要点：

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。

2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过最易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。

4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。

5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。

6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

保存和应用:客户可以根据自己的需求选择新鲜或者冻存的原代细胞,如是新鲜原代细胞,客户收到细胞后应立即将其放入CO2细胞培养箱内静置后2-3h,再进行后续的实验操作。如是冻存细胞,客户收到细胞后应立即将其放入液氮、-80℃冰箱或立即进行复苏。该细胞只可用于科研,不得用于。

U266B1 [U266], 人多发性骨髓瘤细胞

Hep G2, 人肝癌细胞系

PC-12(高分化)，PC12，大鼠肾上腺髓质嗜铬瘤分化细胞株(高分化)

GH3, 大鼠垂体生长激素腺瘤

Hepa 1-6, 小鼠肝癌细胞

QBC-939, 人胆管癌细胞

B16-F10, 小鼠黑色素瘤高转移细胞

SGC-7901, 人胃腺癌细胞系

SK-N-SH, 人神经母细胞瘤细胞

SK-MEL-1, 人皮肤黑色素瘤细胞

A549, 人肺癌细胞系

A-375 [A375], 人恶性黑素瘤细胞株

A549/DDP, 人肺腺癌耐药细胞株

SP2/0, 小鼠骨髓瘤细胞

WM35, 人黑色素瘤细胞

BxPC-3, 人原位胰腺腺癌细胞株

U-2 OS, 人骨肉瘤细胞

WM451, 人黑色素瘤细胞

SW 1990 [SW-1990, SW1990] , 人胰腺癌细胞

C6, 大鼠脑胶质瘤细胞

UM-UC-3, 人膀胱移行细胞癌

Hela, 人宫颈癌细胞系