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阿留申病病毒探针法荧光PCR检测试剂盒样品RNA的抽提

点击次数:501 更新时间:2022-09-27

阿留申病病毒探针法荧光PCR检测试剂盒样品RNA的抽提:

①取冻存已裂解的细胞,室温放置5分钟使其*溶解。

②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的,盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后,15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚相,中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA,混匀后15到30℃孵育10分钟后,于4℃下12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。

④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混匀后,4℃下7000rpm离心5分钟。

⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。

⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时,先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次,使其*溶解,获得的RNA溶液保存于-80℃待用。

2 RNA质量检测

1)紫外吸收法测定

先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后,读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值,测定RNA溶液 浓度和纯度。

① 浓度测定

A260下读值为1表示40 g RNA/ml。样品RNA浓度(g/ml)计算公式为:A260 ×稀释倍数× 40 g/ml。

alpha 1 Fetoprotein甲胎蛋白抗体

ATM毛细血管扩张性共济失调症突变蛋白抗体

ABCF2ATP结合盒转运蛋白2抗体

ABLIM3肌动蛋白结合蛋白LIM蛋白3抗体

Acidic Calponin酸性钙调蛋白3抗体

phospho-ADAM17 (Thr735)磷酸化CD156b抗体

ADH5乙醇脱氢酶5抗体

ADH6乙醇脱氢酶6抗体

AGPAT5溶血磷脂酰基转移酶5抗体

AIPL1遗传性失明相关蛋白AIPL1抗体

AIRE免疫调节蛋白AIRE抗体

phospho-AKT1 (Ser473)磷酸化蛋白激酶AKT1抗体

phospho-AKT1 (Thr72)磷酸化蛋白激酶AKT1抗体

phospho-AKT1 (Tyr326)磷酸化蛋白激酶AKT1抗体

ALDH1A2乙醛脱氢酶2型抗体

ALDH9A1γ-氨基丁酸醛脱氢酶抗体

AGPS衰老相关蛋白5抗体

phospho-alpha B Crystallin (Ser59)磷酸化热休克蛋白β5/αb晶体蛋白质/α-晶体蛋白b链抗体

AMBN釉基质蛋白抗体

phospho-AMPK alpha 2 (Ser176)磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶α2抗体

phospho-AMPK alpha 2 (Ser491)磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶α2抗体

phospho-Androgen Receptor (Ser515)磷酸化雄激素受体抗体

phospho-Androgen Receptor (Ser791)磷酸化雄激素受体抗体

phospho-Androgen Receptor (Ser94)磷酸化雄激素受体抗体


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