人抗浦肯野细胞抗体/抗Yo抗体酶联免疫分析试剂盒操作步骤
人抗浦肯野细胞抗体/抗Yo抗体(PCA-1/Yo)酶联免疫分析试剂盒操作步骤:
1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在*、第二孔中分别加标准品100μl,然后在*、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从*孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品zui终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。 6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
核突触蛋白α抗体Alpha-Synuclein 0.1ml
自噬相关蛋白4B抗体APG4B 0.2ml
α-辅肌动蛋白4(内参)抗体alpha Actinin 4-Loading Control 0.1ml
碱性磷酸酶抗体Alkaline Phosphatase 0.1ml
AU1 tag标签抗体AU1 tag 0.1ml
脂肪细胞增强结合蛋白1AEBP1 0.2ml
蛋白激酶BAKT1 0.1ml
蛋白激酶BAKT1 0.1ml
血管生成素样蛋白2抗体ANGL2 0.1ml
血管生成素3/血管生成素4抗体Angiopoietin 4 0.1ml
膜粘连蛋白 I抗体Annexin I 0.1ml
膜粘连蛋白 Ⅱ抗体Annexin A2 0.1ml
活化转录因子1抗体ATF1 0.1ml
水通道蛋白4抗体Aquaporin 4 0.1ml
活化复制因子2抗体ATF2 0.1ml
腺苷单磷酸活化蛋白激酶β1抗体AMPK beta 1 0.1ml
糖尿病相关肽/胰岛淀粉样肽抗体Amylin 0.1ml