人假定蛋白LOC677168 elisa试剂盒操作步骤：

1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

2400pg/ml 5号标准品 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液

1200pg/ml 4号标准品 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液

600pg/ml 3号标准品 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液

300pg/ml 2号标准品 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液

150pg/ml 1号标准品 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液

2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4. 配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用

5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7. 温育：操作同3。

8. 洗涤：操作同5。

9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.

10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。

小鼠sCD40配体(mouse sCD40 Ligand)

小鼠CD34(mouse CD34)

小鼠可溶性白细胞分化抗原40配体(mouse sCD40L)

小鼠补体C3a(mouse C3a)

小鼠补体C5a(mouse C5a)

小鼠血清总补体(mouse CH50)

小鼠肌酸激酶(mouse CK)

小鼠肌酸激酶同工酶(mouse CK-MB)

小鼠羟甲基赖氨酸(mouse CML)

小鼠C-肽(mouse C-peptide)

小鼠粒细胞集落刺激因子(mouse G-CSF)

小鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(mouse GM-CSF)

小鼠巨噬细胞集落刺激因子(mouse M-CSF)

小鼠双链DNA(mouse dsDNA)

小鼠多巴胺(mouse Dopamine)

小鼠二胺氧化酶(mouse DAO)

小鼠D-二聚体(mouse D-Dimer)

小鼠二肽基肽酶Ⅳ(mouse DPP4)

小鼠β内啡肽(mouse β-EP)

小鼠表皮生长因子(mouse EGF)

小鼠表皮生长因子受体(mouse EGF R)

小鼠内皮素-1(mouse Endothelin-1)

小鼠噬酸性粒细胞趋化因子(mouse Eotaxin)

小鼠促红细胞生成素(mouse EPO)

小鼠红细胞生成素受体(mouse EPOR)

小鼠嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(mouse ECP)