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维生素AElisa试剂盒使用需要留意的事项

点击次数:367 更新时间:2023-02-13

  维生素AElisa试剂盒运用双抗体夹心ELISA法定量测定其他血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清液和其他生物液体中维生素A(VA)ELISA试剂盒含量。实验原理:将维生素A(VA)抗体包被于96孔微孔板中,制成固相载体,向微孔中分别加入标准品或标本,其中的维生素A(VA)与连接于固相载体上的抗体结合,然后加入生物*化的维生素A(VA)抗体,将未结合的生物*化抗体洗净后,加入HRP标记的亲和素,再次洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,井在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的维生素A(VA)呈正相关。
  维生素AElisa试剂盒使用注意事项:
  1.试剂准备:准备一次实验所需要的酶标条,其它的可从微孔板上拆下,密封,按照说明书要求保存,以备下次使用。
  2.加样:实验操作中请使用一次性的吸头,避免交叉污染。加样时注意不要有气泡,将样品加于酶标板底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。加样或加试剂时,个孔与后一个孔加样之间的时间间隔如果太大,将会导致不同的“预温育”时间,从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。因此,一次加样时间好控制在十分钟内。
  3.温育:为防止样品蒸发,实验时请将加上盖或覆膜的酶标板置于湿盒内,以避免液体蒸发,洗板后应尽快进行下步操作,任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态,同时应严格遵守给定的温育时间和温度。
  4.洗涤: 充分的洗涤非常重要,在每次洗涤过程中,都要将洗涤液甩干。洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上拍干,勿将滤纸直接放入反应孔中吸水,同时要消除板底残留的液体和手指印,避免影响*后的酶标仪读数。如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。
  5.反应时间的控制:加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化,如颜色较深,请提前加入终止液终止反应,避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数。
  6. 底物:底物请避光保存,在储存和温育时避免强光自接照射。
  7.如果实验室内湿度低于60%,推荐使用加湿器提高湿度水平。
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