【中文名称】：鲍疱疹样病毒PCR检测试剂盒

【英文名称】：Abalone Herpeslike Virus(AbHV)PCR

【产品规格】：96T/48T。

【保存条件】：2-8℃低温保存

【保质期】：6个月，所有试剂盒均提供批次。

检测原理

试剂盒针对鲍疱疹样病毒的保守基因序列设计特异性引物（荧光定量款搭配专属荧光探针），通过PCR扩增反应特异性放大病毒核酸片段。普通PCR款扩增产物经琼脂糖凝胶电泳，在551bp目标片段位置出现特异性条带即可判定为阳性；荧光定量款可通过实时监测扩增过程中的荧光信号，结合梯度稀释的标准曲线实现病毒载量绝对定量。

探针法荧光定量PCR款操作流程

‌阳性对照梯度稀释‌：在独立的污染防控区域，用模板稀释液将1×10⁸拷贝/μL的阳性对照做10倍梯度稀释，得到10²~10⁷拷贝/μL共6个浓度的标准品，用于构建标准曲线。

‌反应体系配制（20μL体系）‌：

每个反应管加入10μL 2×qPCR MagicMix、2μL引物探针混合液、6μL无酶水、2μL核酸模板

同步设置PCR阴性对照（无酶水为模板）、PCR阳性对照（10⁴拷贝/μL标准品为模板）

‌qPCR扩增程序‌：95℃预变性3min；95℃ 10s → 60℃ 30s，共40个循环，在60℃阶段采集荧光信号。

结果判读标准

普通PCR：目标样本电泳条带位置与阳性对照一致，且所有对照结果正常，判定为鲍疱疹样病毒阳性；无对应条带判定为阴性。

荧光定量PCR：Ct值≤35且扩增曲线呈典型S型，阴性对照无扩增，判定为阳性；Ct值＞38或无扩增曲线判定为阴性；Ct值35~38之间需重复复检确认。

关键注意事项

所有试剂全程-20℃避光保存，避免反复冻融，融化后需涡旋混匀并瞬时离心，所有操作在冰上进行。

严格分区操作：试剂配制区、样本提取区、扩增检测区物理隔离，全程使用带滤芯无核酸酶枪头，防止气溶胶交叉污染。

阳性对照必须在独立区域操作，严禁将高浓度阳性对照带入试剂配制区和样本处理区，避免污染整批试剂。

废弃反应管、枪头等耗材需经121℃高压灭菌30分钟后再丢弃，扩增产物按实验室生物安全废弃物规范处理。

不同批号的试剂盒组分禁止混用，封板膜仅限一次性使用，避免交叉污染。

本试剂盒仅用于水产科研与鲍鱼疫病监测，不可用于动物临床诊断或人体相关检测，可特异性检测鲍鱼组织、养殖水体等样本中的鲍疱疹样病毒（AbHV）核酸，引物经过优化无交叉反应，覆盖普通PCR款与探针法荧光定量PCR款两种规格。