乳腺组织培养

直接培养法：

  1．在含有少量培养液或Hanks液的容器中，用锋利刀片将组织反复切割成碎块。

  2．把组织碎块连同液体注入离心管中，再补加少许培养液，用吸管吹打片刻， 
置试管架3～5分钟。吸除上层液可排除非乳腺细胞部分。重复2～3次。

  3．末次处理结束后，向沉降管中再补加培养液，用吸管稍吹打，使沉降物重悬。 
不待细胞团块下降立即通过3～4层无菌纱布滤入另管中。

  4．调整好适宜密度，接种入培养瓶中培养。

上皮细胞培养

表皮细胞培养

  1．取材：取外科植皮或手术残余皮肤小块，以角化层薄者为佳，早产流产儿皮 
肤更好，切成0.5～1平方厘米小块。

  2．EDTA处理：先置入0.02％EDTA中室温置5分钟。

  3．冷消化：换入0.25％中，置4℃过夜。

  4．分离：取出皮肤，用血管钳或镊子把表皮与层分开。

  5．温消化：取出表皮单独处理，用剪刀剪成更小的块后，置入新的0.25％胰蛋 
白酶中，37℃再消化30～60分钟。

  6．用吸管轻轻反复吹打，使成细胞悬液。

  7．培养液：通过80目不锈钢纱网滤过后，低速离心，吸上清，直接加入Eagle 
液和20％小牛血清，制成细胞悬液，接种入碟皿中，CO温箱培养。