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培养基细胞培养方法

点击次数:960 更新时间:2016-09-14

培养基细胞培养方法
1、从手术室无菌取脑髓灰质或白质后,仔细剥除脑膜、血管和纤维成分,置Hanks液中漂洗一、二次。
2、置于30—50倍体积的Hanks液中,此时脑组织比较柔软,反复吹打即制成细胞悬液。
3、把悬液注入离心管室温中直立5—10分钟后,细胞或细胞团快自然下沉,脂肪等杂物易漂浮,可吸除上层、反复二、三次,即可排除脂肪成分和其它碎块并获较多细胞成分。
4、在沉降物中加入适量培养液,通过纱网成纱布过滤,计数并调整细胞密度。
5、接入培养基瓶或皿中,置5%CO2温箱中培养。
该细胞适应环境过程较长,培养基接种后贴壁较慢。贴壁后短期内也可能不见细胞分裂现象,然而一旦生长后即能迅速进入旺盛的增殖状态。细胞传代可以0.25%消化处理。

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